滴眼剂无菌车间生产中常用的灭菌方法

滴眼剂无菌车间生产中常用的灭菌方法有物理法和化学法。其中物理法包括干热灭菌法、湿热灭菌法、射线灭菌法、滤过除菌法；化学法包括气体灭菌法、化学剂灭菌法。常用的有干热灭菌法、湿热灭菌法和气体灭菌法等。

下面介绍滴眼剂无菌车间生产中的灭菌机制和方法：

1.干热灭菌法：干热灭菌法是利用干热空气或火焰进行灭菌的方法，又分为干热空气灭菌法和火焰灭菌法。加热可以破坏细菌的蛋白质与核酸中的氢键，使其蛋白质变性或凝固、核酸破坏、酶失去活性，导致微生物灭亡。

由于干燥状态下微生物菌体含水量较低，耐热性相应增强，须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。一般认为繁殖性细菌在100以上干热1h即可被灭活，但耐热性细菌芽胞在120以下长时间加热也不死亡，到达140时灭菌效率则急剧增大。相关规范规定，干热空气灭菌的条件是160~170120min以上，170~18060min以上，25045min。具体灭菌参数应结合设备、物品情况进行灭菌验证而取得。

干热空气灭菌法适用于在高温下不损坏、不变质、不蒸发的物品的灭菌，例如玻璃制品、金属制品、陶瓷制品、不允许湿气穿透的油脂类和耐高温的粉末化学品等。本法不适于橡胶、塑料及大部分制品的灭菌。在滴眼剂生产中也常采用干热空气灭菌法，如无菌玻璃瓶的灭菌。

2.湿热灭菌法：湿热灭菌法是在沸水或流通蒸汽中进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，易使菌体蛋白质变性或凝固，所以灭菌效率比干热灭菌法高得多。

煮沸灭菌法是将待灭菌物品放入沸水中加热灭菌的方法。当水温达到100时，几乎能立刻灭活繁殖体、真菌、螺旋体。细菌芽胞抗煮沸能力较强，灭菌时间在15min至数小时不等，通常煮沸30~60min。煮沸灭菌效果较差，常用于注射器、注射针等器皿的灭菌，必要时应以适当的灭菌剂灭活细菌芽胞。中净环球净化可提供无菌车间、洁净室的咨询、规划、设计、施工、安装改造等配套服务。

流通蒸汽灭菌法又称为常压蒸气灭菌，系指在常压下100流通蒸汽加热灭活微生物的方法。本法不能保证灭去所有的芽胞，是一种不可靠的灭菌法。仅适用于灭菌及不耐高热的制剂的灭菌，灭菌时间通常为30~60min。

低温间歇灭菌法是将待灭菌物品用60~80的水或流通蒸汽加热1h，将其中的细胞繁殖体灭去，然后在室温中放置24h，让其中的芽胞发育成为繁殖体，再次加热灭菌放置，反复进行3~5次，直至芽胞灭活为止。本法适用于不耐高温的制剂的灭菌。

热压灭菌法又称为高压蒸汽灭菌，是用大于常压的饱和水蒸气加热灭活微生物的方法。此法灭菌可靠，效果很强，能灭活所有细菌繁殖体和芽胞，是制剂生产中应用广泛灭菌方法。凡能耐高压蒸汽的制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、膜过滤器、生产用具等都能采用此灭菌方法。

3.气体灭菌法：气体灭菌法是利用环氧乙烷等烷基化试剂以及气态过氧化氨等强氧化剂对微生物的蛋白质、核酸的作用而将微生物灭活的方法，可用于不耐加热的塑料制品、器具、设施、设备等的灭菌。常见灭菌剂包括环氧乙烧、甲醛、环氧丙烷、臭氧等。制剂生产中环氧乙烷应用比较广泛。

环氧乙烷具有穿透性强、不损害物品、灭菌谱广等优点，能灭活细菌芽胞、真菌、立克次体等，它的作用方式是非特异性的，以烷基化作用烷化菌体内蛋白质上的羧基、巯基等活性基团，使酶代谢过程发生障碍，从而破坏细菌的新陈代谢。适用于化学纤维织物、生物制品、纸张、文件、金属器具、塑料制品、某些橡皮制品和细菌培养基等的灭菌。但其不适用于对产品质量有损害的场合，灭菌后的气体残留期较长，使用受到一定限制。在滴眼剂无菌车间生产中，塑料滴眼液瓶及其他不能采用热压灭菌的纸张、文件、塑料袋采用环氧乙烷灭菌。

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