产品简介

荧光标记siRNA是检测转染效率、优化转染方法最常用的一个工具。荧光标记siRNA转染细胞后，可以直接使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜观察，也可以通过流式细胞仪检测，衡量是否为有效转染及转染效率的高低。荧光标记siRNA还可用作追踪siRNA在细胞内的定位及动物体内的分布情况。

                  表3  锐博生物荧光标记siRNA种类

注：1）FAM很容易淬灭，操作时避光要求更严格。

2）由于Cy5的最大发射波长为680nm，通常观察Cy5时需使用激光扫描共聚焦显微镜或流式细胞仪。

运输与保存

产品一般以冻干粉避光保存，常温运输。收到产品后，请于 -20℃~-80℃保存，避免荧光标记siRNA在紫外光或可见光下暴露，可稳定保存一年以上。使用时请用灭菌的RNase-free H₂O或者灭菌的ddH₂O，避光配制20μM溶液，建议分装保存。如需长期保存，产品最好以冻干粉形式保存，

1. 转染

1) 建议转染时室内和超净台内不要开日光灯(FAM避光要求更严格)；转染操作要快，操作时间要短，操作完毕后，请尽快将培养板放到培养箱。

2) 使用Lipo2000作为转染试剂，转染后4~6h即可进行转染效率的检测。

2、检测

2.1细胞荧光显微镜检测注意事项：

1) 检测时为了减少背景干扰，可以先用PBS或细胞洗涤液清洗细胞1~2次，把没有转染进去而残留在培养基或吸附在细胞表面的荧光标记siRNA洗掉。注意洗涤时小心，不要使细胞也一同洗脱落掉。

2) 检测时先使光路对准没有转染荧光标记siRNA的孔，调好焦距后转向对准转染孔，打开激发光后马上观察拍照，并在同一视野中拍下明场的细胞照片。

3) 初次操作，可能未必能成功，请妥善保存好未用完荧光标记siRNA，-20℃避光保存！！熟悉操作后，重做一次，请务必小心操作，细节上的失误可能导致实验失败。注意：如果重复次数太多，荧光难免减弱，建议分管保存！

4) 检测效果还与检测时间、仪器的灵敏度等因素相关。

2.2流式细胞仪或激光共聚焦显微镜检测请参照仪器说明书。