IMHA诊断取决于全血细胞计数、血清生化检测和尿液分析（见表4）存在溶血性贫血，然后识别抗红细胞膜抗体。进一步诊断检测需要判断是否存在潜在继发病因。

表4 犬IMHA全血细胞计数和血清生化异常

IMHA诊断首先确定出现贫血，贫血通常为中度至显著贫血，通常为再生性，约30%患犬和多于50%的患猫贫血为非再生性。IMHA非再生性贫血原因包括急性发作和出现，骨髓仍未来得及出现反应以及出现对抗骨髓前体的抗体。在后者，网织红细胞在进入外周循环之前被破坏。在缺少再生性反应时，血细胞比容快速下降而血清总蛋白或白蛋白浓度变化很小应该被认为溶血可疑。在骨髓生成红细胞减少性贫血，每天血细胞比容下降不应该超过1%，而失血性贫血血细胞比容下降通常伴有总蛋白或白蛋白浓度下降，见表5。

表5 不同原因所致贫血全血细胞计数变化

多数IMHA犬也存在炎性白细胞象，经常伴有不成熟白细胞、血小板减少症、凝血系统异常（包括aPTT和PT延长，D-二聚体和纤维蛋白原降解产物升高，抗凝血酶下降，纤维蛋白原升高）。血小板减少症病因包括抗血小板抗体和抗红细胞抗体出现、弥散性血管内凝血或脾脏扣押。

血涂片出现自体凝集或球形红细胞增多症可认为确定存在抗体介导性红细胞溶血。自体凝集通过肉眼或血涂片显微镜检查确定，通常可诊断为IMHA。自体凝集必须与缗钱样形式区分开来。

球形红细胞是巨噬细胞移除了部分抗体覆盖的红细胞膜而形成的，这导致正常盘形结构丢失、尺寸减少、中心苍白区丢失。球形红细胞较正常红细胞更脆且不易变形，通过脾脏时被清除。球形红细胞在犬易被识别，但在猫识别困难，因为其正常红细胞缺乏显著的中心苍白区。球形红细胞被认为是IMHA标志性形态学变化，在犬出现足够数量时可诊断为IMHA。当然，少量球形红细胞也可见于非免疫性因素损伤红细胞后的血涂片，如锌中毒、低磷血症、氧化损伤、立克次体疾病、肿瘤、微血管病性贫血。定量球形红细胞技术通常为半定量。回顾性研究显示约90%IMHA犬血涂片存在球形红细胞；然而，少量出现可见于每个急性溶血犬。影细胞是经历血管内溶解的残存的红细胞膜。溶解可能由免疫性或非免疫介导性机制所诱发，因此，影细胞对于IMHA不具有诊断意义。

当自体凝集或球形红细胞增多症不出现时，使用多价抗血清的直接库姆斯试验最常用于诊断IMHA。不过，该检测对于IMHA确诊既不敏感也不特异。阳性库姆斯试验表明红细胞表面存在抗体、补体或二者都存在，但并不意味着抗体针对红细胞膜或抗体引起的溶血。约60~80%犬IMHA病例库姆斯试验阳性。相反，阳性库姆斯试验也能出现于各种其它炎性疾病，引起假阳性结果。

对于犬猫IMHA应该找寻继发性病因，因为潜在疾病可能影响治疗方案和预后。潜在继发性病因参见表6。排除继发性IMHA诊断方法包括完整的用药史、免疫和毒素接触；详细的体格检查，包括直肠、眼睛和神经学检查；特定传染性疾病检查；查找慢性抗原刺激病因；查找肿瘤病因。除了全血细胞计数、生化检测和尿液分析外，诊断性检测还包括尿液培养、腹部和胸腔放射学检查、腹部超声波、骨髓细胞学或组织病理学（如果贫血为非再生性，两者都检查）以及传染性疾病合适的滴度。

表6 犬猫IMHA继发性病因

犬非再生性原发性IMHA骨髓评估结果通常揭示红细胞系超常增生，髓细胞/红细胞比值低，成熟停止在中幼红细胞或晚幼红细胞期可能也被观察到。基于球形红细胞增多症或阳性库姆斯检测结果，一些起初怀疑存在IMHA的犬存在纯红细胞再生障碍。许多非再生性IMHA犬骨髓活组织检查可发现骨髓纤维化。在骨髓纤维化犬，通过抽吸细胞学收集足量骨髓成分是困难的。骨髓纤维化可能是骨髓损伤继发性反应，在犬有效治疗后可能解决。

在犬，没有典型形态学变化的免疫介导性溶血（再生性贫血、自体凝集、球形红细胞），确诊IMHA具有一定的挑战性。这些病例阳性直接库姆斯试验应该谨慎解释，因为假阳性可能出现。合理的方法是排除其它贫血病因，如果没有找到其它贫血病因，使用库姆斯试验和其它溶血指标作为IMHA的证据。