血清T₄浓度用于初始检查，但检查甲状腺功能必须包括T₄、MED法测定的fT₄、cTSH和Tg自体抗体，这样能提供更多关于垂体－甲状腺轴和甲状腺功能的信息。当存在相应临床症状和临床病理学变化，犬血清T₄和fT₄浓度下降，血清cTSH浓度升高时，强烈支持甲状腺机能减退的诊断。Tg自体抗体阳性表明淋巴细胞性甲状腺炎是潜在的病因。不幸的是，经常会出现不一致的检查结果。出现这种情况时，相应的临床症状、临床病理学异常和兽医的怀疑系数成为是否用左旋甲状腺素钠治疗的主要因素。

    当评价甲状腺功能时，MED法测定的血清fT₄浓度是检查甲状腺功能最准确的方法，为首选检测项目，其次是总T₄。当这些检测结果与fT₄一致时，cTSH浓度可增加甲状腺机能正常或减退确诊的可靠性，但cTSH结果不能单独用作确诊甲状腺机能减退。约20%甲状腺机能减退犬可见血清fT₄下降而cTSH正常，患甲状腺机能正常病态综合征的犬可见cTSH检测结果升高。血清fT₄正常而cTSH升高可能意味着处于甲状腺机能减退的早期代偿期，如果血清fT₄浓度正常，应考虑为何出现临床症状。Tg自体抗体阳性仅表明存在淋巴细胞性甲状腺炎的可能，Tg自体抗体检测不是甲状腺功能检测的指标。如果血清T₄和fT₄都下降，其阳性结果增加了怀疑甲状腺机能减退的可能性。但如果血清T₄和fT₄正常，则不会出现临床症状。当面对不一致的检测结果时，可能考虑用左旋甲状腺素钠尝试治疗或将来复检这些项目――通常主要基于相应的临床症状和MED法的fT₄测定结果作以上决定。

    判读T₄、fT₄和cTSH有时比较复杂。由于费用问题和检测手段的不可靠性，许多兽医和一些宠物主人更愿意采用治疗性诊断。只有当甲状腺素治疗不会对患犬引起严重副作用时，才能进行治疗性诊断。犬对左旋甲状腺素钠的反应是非特异性的。治疗效果明显的患犬可能是甲状腺机能减退或“甲状腺素反应性疾病”。由于它的组织合成作用，添加甲状腺素对无甲状腺机能异常犬也会有一定效果，特别是被毛的质量。因此，如果观察到尝试性治疗的效果时，当临床症状消失后，左旋甲状腺素钠应逐渐停止给予。如果临床症状复发，可以证实是甲状腺机能减退并再用甲状腺素治疗。如果临床症状不复发，表明是“甲状腺素反应性疾病”或对并发疾病治疗的有利反应的结果（例如，抗生素、跳蚤治疗）。

先前治疗犬的诊断　

    偶尔兽医会想知道用甲状腺素治疗的犬实际上是不是甲状腺机能减退。外源性添加甲状腺素（T₄或T₃）会抑制垂体TSH分泌并引起促甲状腺细胞萎缩，继发引起甲状腺机能正常犬的甲状腺萎缩。血清T₄、T₃和cTSH均降低或无法检测；降低的严重程度取决于补充甲状腺素引起甲状腺萎缩的严重程度。如果停止甲状腺素1个月后做检测，即使先前甲状腺机能正常，血清T₄和fT₄检测结果通常表明存在甲状腺机能减退。在测定基础血清T₄浓度之前，应先停止补充甲状腺素并使垂体-甲状腺轴功能恢复。停止补充甲状腺素至测定甲状腺功能的间隔取决于治疗持续时间、用药频率和个体差异。一般在检测甲状腺功能前，至少停药4周，最好是6~8周。

幼犬的诊断　

    上述的诊断方法可用于先天性甲状腺机能减退的诊断，不过血清cTSH主要取决于病因。当犬患原发性甲状腺功能异常（例如，碘有机化缺陷）而下丘脑-垂体-甲状腺轴正常时，cTSH浓度可能会升高。而犬患垂体或下丘脑功能不全引起甲状腺机能减退时，cTSH浓度可能正常或无法检测。测定cTSH和血清甲状腺素浓度的TRH刺激试验有助于定位疾病部位。