甲状腺功能的评价主要是测定基础血清甲状腺素的浓度。目前有几种基础甲状腺激素检查，包括测定甲状腺素（T₄）、游离T₄（fT₄）、3,5,3’ -三碘甲腺原氨酸（T₃）、游离T₃（fT₃）、3,3’,5’-三碘甲腺原氨酸（逆-T₃[rT₃]）和内源性TSH浓度。甲状腺分泌的大部分激素是T₄，仅分泌少量的T₃和微量的r-T₃。T₄进入循环后，99%都与血浆蛋白结合。未结合或游离的T₄具有生物活性，通过副反馈机制抑制垂体TSH的分泌，也可进入全身组织细胞。尽管甲状腺素进入组织的变化很快，但是蛋白结合的T₄可作为一个存贮池，缓冲并维持稳定的血浆T₄浓度。在细胞内，根据特定时刻组织代谢的需要，fT₄脱碘形成T₃或rT₃。组织代谢正常时优先生成T₃，而在疾病、饥饿或内源性分解代谢过多时，生成无生物活性的rT₃。T₃与细胞内线粒体、细胞核和浆膜上的受体结合产生生理作用。由于T₃强大的生物学活性、其在细胞内分布的量超过T₄、T₄脱碘优先形成T₃以及存在T₃特异性受体，T₃被认为是产生生理活性的主要激素。

    无论与蛋白结合的还是游离的T₄都来源于甲状腺，因此测定血清总T₄和游离T₄，结合血清TSH浓度，可用于评价怀疑患有甲状腺机能减退犬的甲状腺功能。相反，多数T₃和fT₃是在甲状腺外，特别是肝脏、肾脏和肌肉中由T₄脱碘形成的。T₃主要存在于细胞内，相对于T₄甲状腺的分泌量很少，因此不适合用于评价甲状腺功能。评价犬甲状腺功能时，不推荐测定血清T₃、fT₃和rT₃。

 

基础血清T₄浓度

    基础血清T₄浓度是血液循环中与蛋白结合和游离T₄的总和。血清T₄浓度的检测可用于诊断甲状腺功能减退的初始检查，或作为包括T₄、fT₄、TSH和淋巴细胞甲状腺炎抗体检查的甲状腺功能检查的一部分。

    放射免疫分析（RIA）测定血清T₄比临床用的ELISA法（例如，快速T₄检测、IDEX仪器检测）更准确。理论上，判读血清甲状腺素浓度是很直接的，甲状腺机能减退患犬的甲状腺素浓度应比健康犬低。不幸的是，甲状腺机能减退患犬与健康犬的T₄浓度有重叠的区域，当甲状腺正常的犬患其它疾病时，这种重叠可能会更明显。诊断甲状腺机能减退时，采集血样时机体残余的甲状腺功能，抑制甲状腺素浓度的外源性因素和存在循环抗甲状腺素抗体都会影响血清T₄浓度对于诊断甲状腺机能减退的敏感性和特异性。

    单个血清T₄值不能用于判断甲状腺机能是否正常。评价T₄值时应结合病史、体格检查和其它临床病理学信息。所有这些信息都会提供甲状腺机能减退或甲状腺功能正常的线索。对兽医来说，很难判断外源性因素对血清T₄浓度的影响，特别是并发其它疾病时。由于这些异常可将正常犬基础血清T₄浓度抑制在0.5 μg/dl以下，而甲状腺机能减退患犬血清T₄浓度很少高于1.5 μg/dl，所以血清T₄浓度可用于判断甲状腺机能正常。血清T₄浓度越高，犬甲状腺机能越可能是正常的，但血液循环中出现甲状腺素抗体的甲状腺机能减退患犬例外。相反，假设病史、体格检查和临床病理学检查结果与甲状腺机能减退很类似，T₄值越低，犬越可能是甲状腺机能减退。如果甲状腺机能减退的怀疑系数不是很高，而血清T₄浓度比较低，应考虑其它因素，如甲状腺机能正常的病态综合征。

 

基础血清fT₄浓度

    目前血清fT₄可用两种方法检测：用于人的RIA试剂盒和改良平衡透析法（MED）。MED是用短透析把fT₄与蛋白结合的T₄分离，接着用RIA测定fT₄。MED法是测定血清fT₄最准确的方法，评价犬甲状腺功能时优先选择测定fT₄。在所有的研究中，MED分析的准确率高于90%，而血清T₄的准确率为75%~85%。通常MED法测定的血清fT₄值高于1.5 ng/dl时，甲状腺功能是正常的，而低于1.0 ng/dl（特别是低于0.5 ng/dl）且病史、体格检查和临床病理学异常都相符时，表明存在甲状腺机能减退。用MED法测定fT₄时，循环抗甲状腺素抗体不会影响fT₄的检测结果。虽然严重的疾病会导致fT₄浓度低于0.5ng/dl（见并发病[甲状腺机能正常的病态综合征]），但血清fT₄受并发疾病抑制因素的影响较血清T₄小。

 

基础内源性犬TSH浓度

    目前有两种有效的犬TSH（cTSH）测定方法：市场上可购买的诊断产品公司（DPC, Los Aangeles, Calif）生产的放射免疫分析法和密西根州立大学兽医学院动物健康诊断实验室内分泌科提供的内部cTSH分析。不幸的是，甲状腺机能减退犬与患有并发疾病的甲状腺机能正常犬的血清cTSH浓度会出现重叠，大约20%甲状腺机能减退犬的cTSH浓度正常（即小于0.6 ng/dl）。在多数研究中，cTSH分析的平均敏感性和特异性约为80%。

　　内源性cTSH浓度必须结合同一血样中的血清T₄或fT₄一起判读，不能当作评判甲状腺功能的唯一检测方法。当病史和体格检查相符，同一血样的血清T₄和fT₄浓度下降而cTSH浓度升高时，表明存在原发性甲状腺机能减退；而血清T₄、fT₄和cTSH浓度均正常时，排除甲状腺机能减退。血清T₄、fT₄和cTSH浓度的其它组合是很难判读的，但由于分析方法的高准确性，推荐用MED法测定的fT₄进行判读。血清T₄或fT₄浓度正常，但血清cTSH浓度升高可见于人原发性甲状腺机能减退早期。虽然在犬也存在类似的甲状腺素和cTSH检测结果，但目前仍不清楚最终发展成临床甲状腺机能减退的比例如何。这些犬甲状腺机能减退的临床症状不明显，部分是因为血清T₄和T₃浓度正常，不推荐用左旋甲状腺素钠治疗。不过，应在2~4月后复检甲状腺功能，特别是淋巴细胞性甲状腺炎抗体阳性时。如果甲状腺出现渐进性破坏，血清T₄和fT₄会随时间推移逐渐下降，内源性cTSH将逐渐上升，最终出现临床症状。

 

TSH和TRH刺激试验

    TSH和TRH刺激试验分别用于评价使用外源性TSH和TRH后甲状腺的反应。这些试验最主要的优点是可用于鉴别甲状腺机能减退和基础甲状腺素浓度下降的甲状腺机能正常病态综合征患犬。虽然TSH刺激试验为首选，但由于费用因素，已不再用于犬猫。尽管TRH注射剂很难购买，但TRH刺激试验仍用于犬猫，但这种试验也不常用。有关文献推荐了大量不同的TRH刺激试验方法，但均须严格按照特殊实验室推荐步骤操作。TRH剂量超过0.1 mg/kg时可能出现的副作用包括流涎、排尿、排便、呕吐、瞳孔缩小、心搏过速和呼吸困难。在做TRH刺激试验时，应使用能最大程度刺激T₄分泌且不会引起副作用的最低剂量。在笔者医院，每只犬（无论体型大小）静脉注射0.2 mgTRH，并于注射前和注射后4小时检测血清总T₄的浓度。

　　甲状腺机能正常犬做TRH刺激试验时，注射TRH后血清总T₄浓度会超过2 μg/dl。另外，正常犬注射TRH后的血清总T₄浓度应比注射前至少升高0.5 μg/dl。相反，原发性甲状腺机能减退患犬注射TRH后血清总T₄浓度低于正常基础血清T₄浓度（即小于1.5 μg/dl），且注射后T₄升高程度应小于0.5 μg/dl。注射TRH后血清总T₄浓度介于1.5~2.0 μg/dl时无决定意义，这可见于甲状腺机能减退早期或甲状腺机能正常但存在并发疾病或使用抑制甲状腺素功能的药物治疗的犬。

 

淋巴细胞性甲状腺炎的检测

    循环中出现甲状腺素（T₄和T₃）和甲状腺球蛋白（Tg）自体抗体被认为与淋巴细胞性甲状腺炎有关。Tg自体抗体与T₄、T₃自体抗体同时存在，且见于T₄和T₃自体抗体阴性的淋巴细胞性甲状腺炎患犬，这表明诊断淋巴细胞性甲状腺炎时，检测Tg自体抗体比检测T₄、T₃自体抗体更好。存在Tg自体抗体表明甲状腺内存在病理变化，但不能提供炎性过程的严重程度或渐进性本质或受影响甲状腺量的大小，也不能反映甲状腺功能情况。甲状腺机能减退犬Tg自体抗体可出现阴性，而甲状腺机能正常犬Tg自体抗体也可能为阳性。如果犬存在相应的临床症状、体格检查结果和甲状腺素测试结果，Tg自体抗体阳性支持淋巴细胞性甲状腺炎所致甲状腺机能减退的诊断。

    Tg自体抗体可用于昂贵品种繁殖前甲状腺炎的筛查。当Tg自体抗体检测结果为阳性时，表明存在淋巴细胞性甲状腺炎，应在几个月后繁殖前复检。血清Tg自体抗体作为最终会发展为甲状腺机能减退标志的价值仍有待研究。最近1年的前瞻性研究表明在171只Tg自体抗体阳性、fT₄和cTSH正常的犬中，1年后约20%犬的fT₄和/或cTSH出现与甲状腺机能减退一致的变化；15%恢复至Tg阴性，而fT₄和cTSH无变化；65%的Tg仍为阳性且fT₄和cTSH依旧正常（Graham and colleagues, 2001）。

    当犬血清T₄值异常时，应测定血清T₄自体抗体值。T₄自体抗体会干扰RIA测定血清T₄浓度，造成测定值无效或失信。干扰的类型主要取决于RIA法的分离系统。如果用非特异性分离系统（如硫酸铵、活性炭），测定值会假性降低；如果是采用抗体包被管的一步分离系统，测定值会假性升高。幸运的是，临床上由甲状腺激素抗体引起的异常T₄值不到商业实验室T₄测定总数的1%。用MED测定的血清fT₄值不受T₄自体抗体的影响。当怀疑存在T₄自体抗体时，应用血清fT₄替代血清T₄的检测。