试题研究：在高中生物中，用血细胞计数板对酵母菌的计数不能专门计数活细胞，但也有染色试剂专门染色活细胞的，结合计数就可以知道活细胞的数目，如台盼蓝就是一种细胞活性染料。

台盼蓝是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，检测细胞是否存活。分子式：C₃₄H₂₄N₆O₁₄S₄Na₄。

一、台盼蓝染色的原理 

台盼蓝可穿透死细胞的细胞膜，使死细胞中的DNA着色，在光学显微镜下可观察到蓝色沉淀，因此可判断此细胞已经死亡，而台盼蓝无法进入活细胞内，故无法使细胞的DNA着色。

二、台盼蓝染色的主要步骤（计数培养的动物细胞为例）

1. 用Hanks液（主要用于细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等）配制0.1%台盼蓝溶液。

2. 用0.5%胰蛋白酶：0.2EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞。

3. 再加入适量Hanks液制成细胞悬液。

4. 将待染色细胞稀释至所需浓度。

5. 每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3－5min。

6. 染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置血细胞计数板上，在高倍镜下观察计数。

7. 死细胞着浅蓝色并膨大，无光泽；活细胞不着色并保持正常形态，有光泽。

8. 计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目。

9. 统计未染色细胞。

10. 按公式计算出细胞活率：

细胞活率（%）=未染色的细胞数/观察的细胞总数×100%。

三、注意事项

染色时间不能太长，否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色，使检测结果偏低。

链接：如何判断细胞是活细胞的常见方法