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DNA的分离提纯技术浅析

(2017-08-06 23:32:02)
标签:

教育

dna的分离

分类: 疑难问题的解决

DNA的分离提纯技术浅析
DNA分离提纯步骤

疑难问题:今天讲到肺炎双球菌的体外转化实验,提到分离提纯技术,当时的条件下提纯技术也相对落后,因此纯度也不高。那么,现在如何进行DNA分离提纯呢?

资料:

DNA提取主要是CTAB方法。CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)呈白色或浅黄色结晶体至粉末状,有刺激气味,易溶于异丙醇,可溶于水,震荡时产生大量泡沫,能与阴离子、非离子、两性表面活性剂有良好的配位性。具有优良的渗透、柔化、乳化、抗静电、生物降解性及杀菌等性能。

其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。

化学方法如异硫氰酸胍法、碱裂解法。

生物方法:酶法。

根据核酸分离纯化方式的不同有硅质材料、阴离子交换树脂等。

新型方法:磁珠法提取核酸的原理及步骤

DNA的分离提纯技术浅析

核酸结合到磁珠上主要依靠静电作用、疏水作用和氢键作用。细胞或组织在裂解液作用下,其中的DNA/RNA被释放出来。此时经过表面修饰的超顺磁性氧化硅纳米磁珠即与核酸进行“特异性结合”,形成“核酸-磁珠复合物”。

然后在外加磁场的作用下,复合物即分离出来。最后经过洗脱液洗去非特异性吸附的杂志、去盐、纯化后,即得到欲提取的核酸物质。

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