细胞培养常用耗材的分类与使用注意事项及延伸建议!
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百欧博伟生物:细胞培养是生命科学研究和生物技术领域的基础技术,其常用耗材种类繁多,不同耗材适用于不同的培养需求和操作场景。以下从分类及使用两方面详细介绍:
一、细胞培养常用耗材分类
根据用途和形态,可分为容器类、工具类、辅助材料类三大类,每类下又有具体细分:
(一)容器类耗材(用于细胞生长、储存或反应)
1、培养皿(Petri Dish)
按规格:常见直径有 35mm、60mm、100mm、150mm 等,也有小规格如 10mm(用于少量细胞培养)。
按用途:分为普通培养皿(通用细胞培养)、共聚焦培养皿(底部为玻璃,适合荧光显微镜观察)、低吸附培养皿(用于悬浮细胞或类器官培养,减少细胞贴壁)。
2、培养板(Culture Plate)
按孔数:6 孔、12 孔、24 孔、48 孔、96 孔(最常用,96 孔板适合高通量筛选),还有 384 孔(超高通量)。
按底部类型:平底(常规培养)、圆底(悬浮细胞如淋巴细胞)、V 底(用于细胞计数或融合实验)。
特殊类型:酶标板(用于 ELISA 等检测,与 96 孔板类似但材质更适合光学检测)、Transwell 板(带通透性膜,用于细胞迁移、侵袭实验)。
3、培养瓶(Culture Flask)
按规格:25cm²(小容量,传代或初期培养)、75cm²(常规培养)、175cm²(大量培养)、225cm²(大规模扩增)。
按形状:直颈、斜颈(方便操作);按瓶盖:密封盖(需配合 CO培养箱)、透气盖(可直接交换气体)。
特殊类型:旋转培养瓶(用于悬浮细胞大规模培养,需配套旋转设备)。
4、储存容器
冻存管:1.5mL、2mL 为主,用于细胞冻存,材质需耐低温(如 PP 材质),有外旋盖和内旋盖(防漏性更好)。
离心管:15mL、50mL(用于细胞离心、洗涤),1.5mL、2mL(小体积反应或试剂储存)。
(二)工具类耗材(用于细胞操作)
1、移液相关耗材
移液枪头(Tip):按规格分 10μL、200μL、1000μL 等,有无菌无酶(细胞培养专用)、带滤芯(防止交叉污染)、低吸附(减少液体残留)。
移液管:玻璃或塑料材质,塑料移液管为一次性使用,规格有 1mL、2mL、5mL、10mL、25mL 等,用于大量液体转移。
2、其他操作工具
细胞刮:用于贴壁细胞的消化后刮取,头部材质柔软(如橡胶或塑料),避免损伤细胞。
过滤膜 / 过滤器:针头式过滤器(0.22μm 孔径,用于培养基或试剂除菌)、真空过滤器(大体积溶液除菌,如培养基批量过滤)。
载玻片 / 盖玻片:用于细胞爬片(贴壁细胞在玻片上生长,便于固定染色后观察),需无菌处理。
(三)辅助材料类(支持细胞生长或实验)
培养基瓶:储存配制好的培养基,通常为 500mL、100mL,材质为 PET 或玻璃,带刻度。
血清瓶:储存胎牛血清等,需避光(棕色瓶)或配合铝箔包裹,防止血清成分降解。
封口膜:用于密封培养板、离心管等,防止污染或液体蒸发。
无菌手套、口罩、生物安全袋:不属于直接培养耗材,但为无菌操作必备。
二、细胞培养耗材的使用注意事项
1、无菌操作原则
所有耗材需确保无菌:优先选择预灭菌产品(包装标注“无菌”),未灭菌的需经高压蒸汽灭菌(如玻璃移液管)或射线灭菌(塑料耗材)。
操作前:超净工作台紫外消毒 30 分钟,耗材开封后避免接触非无菌表面(如瓶口、皿盖内侧)。
2、根据细胞类型选择
贴壁细胞:需使用带表面处理(如包被胶原蛋白、多聚赖氨酸)的培养皿 / 板 / 瓶,促进细胞贴附;悬浮细胞:选择普通或低吸附容器,避免细胞贴壁死亡。
敏感细胞(如原代细胞):优先使用低内毒素、无酶的耗材,减少对细胞的刺激。
3、规格匹配实验需求
小规模实验(如药物筛选):用 96 孔板;大量扩增细胞:用 175cm² 培养瓶。
观察细胞形态:选择共聚焦培养皿或玻璃底培养板,便于显微镜观察。
4、储存与处理
耗材需在干燥、无菌环境下储存,避免阳光直射(尤其塑料耗材,防止老化)。
冻存管使用前需检查密封性,冻存时需梯度降温(如 - 80过夜后移至液氮),避免细胞损伤。
5、污染防控
一次性耗材不可重复使用;多次使用的玻璃器皿需彻底清洗并灭菌。
操作中若发现耗材污染(如浑浊、菌落),需立即丢弃并消毒环境,避免交叉污染。
三、延伸建议
选择知名品牌耗材,保证质量稳定性,尤其对敏感细胞实验至关重要。
根据实验预算合理搭配:常规实验用普通耗材,精密实验(如荧光检测)用光学级耗材(减少背景干扰)。
注意耗材兼容性:如某些有机溶剂会腐蚀塑料,需使用玻璃容器。
掌握细胞培养耗材的分类和使用要点,是保证细胞培养成功率和实验结果可靠性的基础。
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