单料肠球菌肉汤培养基管的使用方法与培养现象!
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单料肠球菌肉汤培养基管(Single Strength Enterococcus Broth) 是一种选择性液体培养基,主要用于肠球菌(如粪肠球菌、尿肠球菌)的增菌培养和初步鉴定,常见于水质、食品或临床样本的微生物检测。以下是其使用方法和培养现象的详细说明:
一、使用方法
1、样本处理
液体样本(如饮用水):直接接种。
固体样本(如食品):需均质后取液体部分接种。
若样本可能含高浓度杂菌(如污水),建议先稀释或过滤处理。
2、接种
接种量:每支单料肉汤管接种1-10 mL样本(具体依据检测标准调整)。
混合:轻柔摇匀,避免气泡产生。
3、培养条件
温度:35-37恒温培养。
时间:24-48小时,部分生长缓慢菌株需延长至48小时观察。
4、质量控制
阳性对照:接种已知肠球菌菌株(如粪肠球菌ATCC 29212)。
阴性对照:不接种或接种无菌生理盐水。
二、培养现象及结果判断
1、阳性结果
浑浊度:肉汤明显浑浊(细菌增殖)。
产酸:培养基pH下降,若含溴甲酚紫指示剂,颜色由紫色变为黄色。
产气:若含倒置杜氏小管,可能出现气泡(某些肠球菌产气)。
2、阴性结果
肉汤保持澄清,颜色无变化。
3、不确定现象
轻微浑浊但无颜色变化:可能为杂菌生长,需进一步验证(如转种选择性平板)。
三、注意事项
1、选择性成分
含叠氮化钠(抑制革兰氏阴性菌)和营养基质(促进肠球菌生长),避免高温灭菌破坏成分。
2、结果验证
阳性管需转种到肠球菌选择性平板进行确认。
3、储存
未开封培养基避光保存于2-8,开封后密封防潮,避免成分氧化。
4、生物安全
处理阳性样本时需遵守生物安全规范,避免气溶胶产生。
四、应用场景
1、水质检测:用于饮用水、环境水中肠球菌的定性与定量分析。
2、食品检测:评估食品卫生状况(如乳制品、即食食品)。
3、临床检验:尿液或伤口样本中肠球菌的初步筛查。
通过以上步骤和现象判断,可初步检测样本中肠球菌的存在,但需结合后续分离鉴定实验确保结果准确性。
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