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麦芽提取物琼脂的工作原理与使用方法及注意事项!

(2025-11-14 15:10:55)
标签:

技术

方法

注意事项

分类: 培养基

       麦芽提取物琼脂的工作原理与使用方法及注意事项!

 


一、原理

 

麦芽提取物琼脂是一种选择性培养基,主要用于真菌(如酵母霉菌)的分离和培养。其原理基于以下成分和作用:

 

麦芽提取物:提供碳源(如麦芽糖、葡萄糖)、氮源及维生素,支持真菌生长。

 

琼脂:作为凝固剂,形成固体培养基便于菌落观察。

 

选择性抑制(可选):

 

添加 氯霉素(50–100 mg/L)抑制细菌生长,避免干扰。

 

酸性环境(pH 5.4–5.6)进一步抑制细菌,促进真菌增殖。

 

二、使用方法

 

1、培养基配制

 

配方(以1 L为例):

 

麦芽提取物:30 g

 

琼脂:15 g

 

氯霉素(可选):0.05–0.1 g(溶于乙醇后加入)

 

蒸馏水:定容至1 L

 

步骤:

 

a.将麦芽提取物和琼脂加入水中,搅拌溶解。

 

b.加热煮沸至完全溶解(避免焦糊)。

 

c.若添加氯霉素,待培养基冷却至约50°C时加入(防止高温失活)。

 

d.调节pH至5.4–5.6(用稀盐酸或氢氧化钠)。

 

2、灭菌与倒平板

 

高压灭菌:121°C、15–20分钟(仅灭菌基础成分,氯霉素需过滤除菌后添加)。

 

冷却至约50°C后倾注无菌培养皿,厚度约3–4 mm,静置凝固。

 

3、接种与培养

 

接种方法:

 

涂布法:适用于液体样本。

 

划线法:用于分离纯菌落。

 

点植法:观察霉菌菌丝扩展。

 

培养条件:

 

温度:25–28°C(多数真菌)或37°C(部分病原性酵母)。

 

时间:3–7天,高湿度环境防止干燥。

 

4、结果观察

 

酵母菌:形成乳白色湿润菌落。

 

霉菌:产生绒毛状或粉末状菌落,可能伴随孢子颜色变化。

 

三、注意事项

 

无菌操作:避免污染,尤其在添加氯霉素时。

 

储存:配制后培养基可冷藏(2–8°C),1个月内使用。

 

安全:高压灭菌时规范操作,防止烫伤;处理真菌孢子时需在生物安全柜中进行。

 

四、应用场景

 

食品、环境样本中真菌检测。

 

实验室保存真菌菌种或研究其形态特征。

 

与其他培养基的区别

 

PDA(马铃薯葡萄糖琼脂)对比:MEA麦芽糖含量更高,更利于某些酵母(如酿酒酵母)生长;PDA适合广泛真菌,尤其霉菌。

 

通过以上步骤,麦芽提取物琼脂可高效分离和培养真菌,是微生物学研究的常用工具。

 

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麦芽提取物琼脂的工作原理与使用方法及注意事项!

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