单料肠球菌肉汤培养基的培养现象与使用方法及验证试验！

 

单料肠球菌肉汤培养基（Single Strength Enterococcus Broth）是一种选择性液体培养基，主要用于肠球菌的增菌培养和检测。以下是其使用方法和典型现象的详细说明：

 

一、使用方法

 

1、样本处理

 

采集水样、食品样本或临床标本（如尿液、粪便等），按标准方法进行预处理（如稀释、过滤或均质化）。

 

2、接种

 

无菌操作下，将1-10 mL待检样本直接接种到单料肠球菌肉汤管中。

 

若样本含杂菌较多（如粪便），可先稀释后接种，减少背景干扰。

 

3、培养条件

 

温度：35-37恒温培养。

 

时间：24-48小时（部分生长缓慢的肠球菌需延长至48小时观察结果）。

 

4、结果观察

 

观察培养基的浑浊度、颜色变化及是否产气。

 

二、培养现象解析

 

1、阳性结果

 

浑浊度：明显浑浊，表明细菌增殖。

 

颜色变化：若含pH指示剂，产酸会使培养基由紫色变为黄色。

 

产气：部分肠球菌可能分解糖类产气，可见小气泡（需倒置 Durham 管观察）。

 

2、阴性结果

 

培养基保持澄清，颜色无变化，无气泡产生。

 

三、验证试验（关键步骤）

 

1、转种确认

 

挑取阳性培养物接种到选择性固体培养基，观察典型菌落（如红色或粉红色菌落）。

 

2、革兰染色与镜检

 

肠球菌为革兰阳性球菌，成对或短链状排列。

 

3、生化鉴定

 

触酶试验：肠球菌触酶阴性（与葡萄球菌区分）。

 

胆汁七叶苷试验：阳性（水解七叶苷变黑）。

 

PYR试验：阳性（水解吡咯烷酮-β-萘胺显红色）。

 

四、注意事项

 

选择性成分：培养基中含叠氮化钠（抑制革兰阴性菌）和胆盐（抑制非肠球菌的革兰阳性菌），但对部分肠球菌可能有轻微抑制，需严格按推荐培养时间操作。

 

假阳性/阴性：某些链球菌可能生长，需生化试验确认；样本过度稀释或抑制剂过量可能导致假阴性。

 

生物安全：操作潜在致病菌时需遵守生物安全规范，废弃物灭菌处理。

 

五、应用场景

 

水质检测：用于评估水中粪源性污染。

 

食品卫生：检测食品中肠球菌污染（指示卫生状况）。

 

临床诊断：辅助鉴定尿路感染或败血症中的肠球菌。

 

通过以上步骤和现象分析，可有效利用单料肠球菌肉汤进行目标菌的筛查与鉴定。若需进一步精准鉴定，建议结合分子生物学方法或质谱分析。

 

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