《外周血HER2基因扩增检测（数字PCR法）在抗HER2治疗中的应用共识》（2022）要点

乳腺癌患者中20%～30%人表皮生长因子受体2（HER2）阳性，该类型乳腺癌具有恶性程度高、侵袭性强、预后差等特点。抗HER2靶向药物能有效地降低HER2阳性乳腺癌患者复发和转移的风险，延长生存期，改善预后，HER2状态是乳腺癌重要的预后评估指标和抗HER2治疗选择的主要预测指标。众多国内外指南和共识均推荐可获取肿瘤组织的乳腺癌患者采用免疫组织化学法（IHC）检测HER2受体蛋白的水平，采用荧光原位杂交法（FISH）检测HER2基因的扩增水平。

但由于肿瘤的时空异质性广泛存在，肿瘤组织的取样可能造成组织检测结果不能反映肿瘤全貌，仅对主要病灶进行IHC检测可能影响部分患者的治疗决策。部分组织样本不可得的晚期乳腺癌患者，由于无法进行组织活检，亦可能错过靶向治疗的机会。另外，组织样本处理欠规范、IHC和FISH检测技术自身的挑战也可能导致组织检测出现假阴性结果，从而导致这部分患者无法接受靶向治疗并从中获益。循环肿瘤DNA（ctDNA）能够反映短时间内的体内肿瘤负荷，实时、动态监测药物疗效，可作为组织样本检测的有效补充，有助于避免由于肿瘤异质性带来的组织样本检测假阴性结果，并且由于液体活检样本易获取，对于不能获取组织样本的晚期乳腺癌患者，可通过ctDNA进行疗效的动态监测和管理，优化治疗方案，对缓解晚期乳腺癌患者的临床症状、延长生存期及改善生活质量有重要意义。

从大量循环游离DNA（cfDNA）、血细胞中筛选出肿瘤相关DNA存在一定难度，数字聚合酶链反应（dPCR）是近年来发展起来的一种定量分析技术，该技术具有灵敏度高、特异度高和绝对定量的优势，外周血HER2基因检测（dPCR法）作为一种辅助诊断的手段，有望使更多的患者从靶向治疗中获益。结合最新的研究数据和理念，专家就HER2基因扩增检测（dPCR法）在乳腺癌治疗中使用的目的与适应证、操作规范与质控标准、临床价值与展望等方面的热点问题进行深入研讨，联合发布本共识，旨在让临床医师更好地利用HER2基因检测（dPCR法）结果，使更多患者从HER2靶向治疗中获益。

1  HER2基因扩增检测（dPCR法）的目的与适应证

1.1  HER2基因扩增检测（dPCR法）的目的

  专家组首先明确了在当前临床实践中，外周血HER2基因扩增检测（dPCR法）应从实际的临床需求出发，以为组织检测提供有效补充为目的。

1.2  适合进行HER2基因扩增检测（dPCR法）的对象

HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）可用于乳腺癌患者抗HER2治疗的伴随诊断和抗HER2治疗过程中的动态监测。此外，也适用于其他肿瘤患者抗HER2治疗的检测需求，检测样本类型为组织和外周血样本，具体如下。

1.2.1 组织样本检测结果阴性或组织样本不可得的初治晚期或复发转移乳腺癌患者，可使用HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）检测外周血样本中的HER2基因状态

  专家建议：  HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）与组织样本检测金标准（IHC联合FISH）检测对组织样本检测具有同等作用，同样适用于乳腺癌患者组织样本中HER2状态的检测。对于初治晚期（、期）的乳腺癌患者，组织检测阴性或组织样本不可得时，可使用HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）在外周血中进行检测。术后复发或转移乳腺癌患者，同样可使用HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）在外周血中进行检测，检测结果为医师提供参考，为患者寻找可能的治疗方案，避免错失治疗时机。

1.2.2  有实时、动态监测乳腺癌患者体内HER2基因状态或药物疗效需求的患者，可使用HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）检测外周血样本中HER2基因状态

 专家建议：  HER2基因扩增检测（dPCR法）可用于多线治疗的HER2阳性乳腺癌患者疗效的动态监测，为判断患者能否从靶向治疗中获益提供参考。对于未行HER2靶向治疗的HER2阴性患者，每个随访周期也可使用HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）在外周血中进行检测，通过对ctDNA的监测，尽早发现HER2基因扩增状态，可为患者治疗方案的管理提供参考。

1.2.3  适用于其他肿瘤患者抗HER2治疗的检测需求

  专家建议：  对于组织检测阴性或复发转移的胃癌患者，如临床或病理学检查认为有可能因样品预处理过程等原因造成假阴性，可使用HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）在外周血中进行再次检测。其他晚期多线治疗的肿瘤患者，临床有抗HER2治疗的需求时，亦可使用HER2基因扩增检测试剂盒（dPCR法）在组织和外周血中进行HER2基因状态的检测。

2  HER2基因扩增检测（dPCR法）的操作规范与质控标准

2.1  检测实验室总体要求

2.2  检测流程及操作规范

2.2.1  样本采集、保存及转运

2.2.2  核酸纯化

2.2.3  dPCR检测

2.2.4  检测结果分析报告

专家建议：  临床检测实验室应保证HER2基因扩增检测（dPCR法）报告的充分性，包括但不限于患者及其样本相关信息、检测相关信息、结果及其临床意义、局限性、准确性等，检测基因类型和位点的变异情况、临床意义、必要的参考文献和可追溯性等。结果解释的责任属于临床检测实验室，检测结果在临床决策中的应用应由临床医师或多学科专家讨论决定。因dPCR手动操作时间少，为尽快为患者提供治疗方案，建议从样本接收到发出检测报告的总时间不超过2个工作日。

2.3  质控标准

专家建议：  为保证检测的成功率及检测结果的正确性，需对样本预处理和检测各环节进行严格质控。

3  临床价值与展望

  近年来，帕妥珠单抗、拉帕替尼、匹罗替尼和恩美曲妥珠单抗等新的抗HER2药物不断成功上市，包括HER2阳性患者新辅助治疗的应用，均在乳腺癌的治疗中取得了良好效果。对患者HER2基因状态检测的灵敏度和准确度，对临床医师制订治疗方案及改善HER2阳性患者的预后均有重大意义。

肿瘤的时空异质性决定了HER2基因扩增组织活检也许不能完全反映肿瘤中HER2基因状态，并且因为穿刺的局限性，也导致无法随着患者治疗的进展而进行多次组织活检。此外，除肿瘤时空异质性之外的原因，如胃癌手术标本没有及时固定、FISH检测其自身的挑战，同样会造成组织活检的假阴性结果。dPCR作为一种新型临床检测方法，其绝对定量的性能及优异的检测精密度，给在DNA水平针对HER2扩增进行检测带来了新的机会。HER2基因扩增检测（dPCR法）除了可以解决组织样品因为样品预处理不规范带来的假阴性结果之外，更重要的是为组织样本检测的有效补充，通过对外周血样本的1次或多次检测，避免因为时空异质性带来的假阴性结果。同时，HER2基因扩增检测（dPCR法）通过外周血样本检测结果动态监测HER2扩增变化，可早于实体瘤疗效评价标准 （RECIST）评估的影像学进展。

  未来对组织检测结果为阴性的初治晚期和复发转移乳腺癌患者外周血样本中HER2状态的复检，可能避免由于肿瘤的空间异质性造成的“漏检”，使这类HER2阳性乳腺癌患者能受益于靶向治疗。另外，对未行抗HER2治疗患者的每个随访周期外周血中HER2状态的动态监测，则可提示临床医师积极调整治疗策略，避免患者错过靶向治疗的最佳时机。另外，HER2基因扩增检测（dPCR法）的应用，亦使除HER2阳性的晚期胃癌、非小细胞肺癌、结直肠癌等患者，有机会从类似DS-8201药物治疗中获益。

〔本资料由朱明恕主任医师根据《外周血HER2基因扩增检测（数字PCR法）在抗HER2治疗中的应用共识》（2022）编写〕

（本共识刊登于《中国癌症杂志》2022年第1期。如欲全面详尽了解，请看全文）

     2022.3.15