例析分离RNA和蛋白质的原理和方法

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教育烟草花叶病毒 |
分类: 试题研究和分析 |
烟草花叶病毒感染后烟草
试题研究:从下列试题中发现,RNA和蛋白质如何分离的?方法还是可以了解,《遗传学》教材中用水和苯酚后,可以分享RNA和蛋白质,完成完整的实验过程和对照实验。但没有具体的原理资料找到,只找到酵母菌的成份分离方法和原理可以参考。
试题:如图表示科研人员探究“烟草花叶病毒(TMV)遗传物质”的实验过程.由此可以判断( A )
A . RNA是TMV的主要遗传物质
B . TMV的蛋白质不能进入烟草细胞
C . RNA在烟草细胞中进行了逆转录
D . 水和苯酚能分离TMV的RNA和蛋白质
解析:据图分析,水和苯酚能分离TMV的RNA和蛋白质,用TMV的RNA和TMV的蛋白质外壳分别感染烟草,TMV的RNA能感染烟草,TMV的蛋白质外壳不能感染烟草。
实验证明RNA是TMV的遗传物质,不能加主要,A错误;实验中,通过接种,能说明蛋白质能进入烟草细胞(也有说法是因为蛋白质不能进入烟草细胞,其实是实验的设计本身就是错误的),B错误;RNA在烟草细胞中进行RNA自我复制,C错误;据图分析,水和苯酚能分离TMV的RNA和蛋白质,D正确。
查到的资料是从酵母中分离制备蛋白质和 RNA 的原理和方法,如下:
实验原理:
酵母细胞富含蛋白质和核酸。用稀碱液(0.2% 的氢氧化钠)处理酵母使细胞裂解,离心收集上清液,得到酵母核蛋白抽提液。
用盐酸调节抽提液 pH 至 3.0 (核蛋白的等电点),核蛋白溶解度下降大量沉出,离心收集沉淀物为酵母蛋白质粗制品。
酵母核蛋白是一种结合蛋白质,是蛋白质与核酸的复合物。酵母核酸主要是 RNA (含量为干菌体的 2.67 %-10.0 %), DNA 含量较少,仅为 0.03% -0.516%。如设法使酵母核蛋自中的蛋白质与核酸分离并除去蛋白质和 DNA ,就可得到较纯的 RNA 制品。
实验方法:
将核蛋自制品溶于含有 SDS 的缓冲液中,加等体积的水饱和酚,剧烈振荡后离心,溶液分成两层,上层为水相含有 RNA,下层为酚相,变性蛋白及 DNA 存在于酚相及两相界面处。吸出水相并加乙醇即可沉淀出酵母 RNA。若用氯仿-异戊醇进一步处理 RNA 制品,可获得纯度更高的 RNA。