斐林试剂检测还原糖的若干疑问解析

   摘自  2020年第8期中学生物教学  第49-50  甘肃临夏中学   马小明

1  斐林试剂是含有Cu2+的碱性溶液

等量混合以1mL考虑，OH-：Cu2+=8:1，可见斐林试剂甲乙液等量混合后并非完全反应生产絮状沉淀Cu（OH）2，而是NaOH过量。Cu（OH）2微显两性，在NaOH过量时，Cu（OH）2可以溶于碱性溶液，形成蓝色透明溶液，其反应为Cu（OH）2和OH-结合形成[Cu（OH）4]2-（四羟基合铜离子，二价铜离子和四个羟基形成配位键），该溶液呈强碱性。这就解释了为什么斐林试剂等量混合并摇匀后得到的是蓝色溶液而非蓝色絮状沉淀。所以斐林试剂是含有Cu2+的碱性溶液是非常确切的。

2 需要现配现用

[Cu（OH）4]2-化学性质不稳定，暴露在空气中会因CO2的溶解导致溶液pH下降，当降到14以下时，[Cu（OH）4]2-会分解产生Cu（OH）2，Cu（OH）2进一步氧化会生成氧化铜黑色沉淀，同时Cu（OH）2沉淀不利于Cu2+与醛基接触。

3 果糖与斐林试剂的反应

果糖本为酮基糖，但在碱性条件下可异构化形成葡萄糖和甘露糖，可逆。葡萄糖和甘露糖可与斐林试剂反应，化学将果糖归为非还原糖是依据其分子官能团的化学性质而言，生物学将之归为还原糖更多依据其与斐林试剂的反应现象，而对内在机理并没有深究。