免疫诊断技术的发展历程
(2015-06-08 15:04:02)
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化学发光免疫分析仪医疗器械全自动免疫分析仪 |
分类: 医疗器械 |
由于化学发光免疫分析技术是由放射免疫技术来的,在谈到化学发光免疫技术之前,让我们首先回顾一下放射免疫测定技术的发展历程、测试方法及特点。放射免疫测定(Radio immunoassay,RIA)是1959年先创建的经典放射免疫分析技术,用于血清中胰岛素含量的测定。四十多年来,由于此项技术灵敏度高、特异性好、并已制成多种标准试剂盒,使用方便而得到了十分广泛的应用。目前国外已成功地应用RIA检测的物质多达300余种,国内研究的被测物质也达百余种,试制的RIA试剂盒已有60余种,是测定各种微量物质不可缺少的手段。RIA是标记抗原和未标记抗原对有限量抗体的竞争性结合或竞争性抑制反应。在RIA反应系统中,标记抗原(Ag’)、末标记抗原(Ag)和特异性抗体者同时存在时,由于两种抗原具有相同的决定簇,互相竞争结合抗体的能力相同,结果形成Ag*-Ab和Ag-Ab复合物。RIA的优点是成本底、灵敏度高;不受周围环境和样本干扰物质的影响;与小颗粒同位素的结合不影响免疫反应和;具有完善的放射测量体系;但其缺点也是显而易见的;同位素的半衰期短,试剂盒不易储存;反应时间过长,并且反应时间不易实现自动化。
化学发光技术是近十几年来发展起来的一种测定方式,利用化学反应释放的自由能激发中间体(常用碱性磷酸酶一金刚烷胺),使其从激发态回到基态,当中间体从激发态回到基态时会释放等能级的光子,通过对光子进行测定而进行定量分析。化学发光具有荧光的特异性,同时不需要激发光,从而避免了荧光分析中激发光杂散光的影响,有很高的灵敏度;并且不像放射分析那样存在强烈的环境污染和健康危害,是一种非常优秀的定量分析方法。1978年,研究人员在RIA和EIA基本理论的基础上,建立了化学发光免疫分析(CLIA,Chemiluminesent Immunoassay)技术,因其具有和RIA相似的灵敏度和特异性,受到国内外学者的重视,并投入了相当的人力和资金对该方法进行研究,并制造测量仪器。大量的实验结果证明,CLIA因光信号持续时间太短,达不到临床应用水平。为解决测量方法上的缺点,一些学者进行了发光稳定剂的研究,90年代初首先由英国公司研究人员发现在HRP催化的Luminol发光反应中加微量对一碘酚,可以使发光信号持续20~30分钟。随后生产出试剂盒。标示了化学发光技术进入了临床应用的开端。全自动化学发光免疫分析仪和化学发光免疫分析仪也相应出现,使免疫学检测进入了黄金时期。