S9:胚胎分割的方法
(2018-07-17 12:03:43)
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教育胚胎分割的方法 |
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1.显微针分割法
该法适用于卵裂球阶段的胚胎。操作时在显微操作仪下将胚胎固定,用玻璃针在透明带上作一切口,将卵裂球从透明带中移出,并吹吸卵裂球使之离散,将其装入2个预先准备好的空透明带内,进行移植。该方法具有较高的同卵双生率,但操作程序复杂
2.显微刀分割法
该法适用于对桑椹胚和早期囊胚进行分割。在显微操作仪下固定胚胎,用特制显微刀片将胚胎均匀一分为二,分别装入空透明带中,进行移植。
3.酶软化透明带后显微分割法
用0.5%的链霉蛋白酶软化胚胎透明带。若是紧密化胚胎(如桑葚胚),则需在无钙、镁的平衡盐溶液中处理20min,使胚胎去紧密化。将胚胎固定,把将针置于欲分割的胚胎上面,使其与胚胎呈30°角,对准胚胎的正中平分线徐徐下压,即可将一个胚胎分割成两半。
4.酶消化去透明带后分割法
用0.25%~0.5%链霉蛋白酶去掉胚胎透明带,然后用显微玻璃针或微手术刀将裸胚一分为二。
5.徒手分割法
徒手分割法主要适用于分割体积较大的胚胎,其优势在于可以不用显微操作仪。在立体显微镜下,用止血钳夹住切割刀片,将透明带切开一部分,再用直径略小于胚胎的毛细管吹吸几次,胚胎从透明带中脱出。手持玻璃针自上而下对称切割裸胚。这种方法多用于分割桑椹胚和囊胚,操作简便、快速,便于生产应用,但要求要有较为灵巧的操作技能。
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