免疫化学发光法实验测定IgE--双抗体夹心
(2011-12-14 09:06:06)
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杂谈 |
今天转载生物帮的一篇文章,是关于免疫化学发光法方面的东西,对这个学科的双抗体夹心法应该很有帮助吧,给他们看一下,主要内容是这样:
这个实验的名称是免疫化学发光法(双抗体夹心法)。
这个方法的原理如下:加入与磁性颗粒共价结合的鼠抗人IgE抗体、待测标本以及吖啶酯标记的羊抗人IgE抗体(1gElite试剂),经过温育形成固相包被抗体—抗原(1gE)—吖啶酯标记抗体复合物,经洗涤后,加人氧化剂(H2O2)发光,其光量子数与IgE浓度呈良好的线性相关。通过光量子数与IgE浓度制作标准曲线,根据样本产生的光量子数可得出IgE含量。
标本准备:静脉血2ml,不抗凝。用到的试剂有两种,第一种是免疫化学发光法配套试剂及定标液,第二种是质控物(高、中、低),仪器为ACSl80免疫发光仪。
检测步骤
第一,将血清编号后加入反应管内,插入样品盘;
第二,将试剂放入试剂盘;
第三,将编号及样品盘号对应输入电脑,并选择检测项目IgE,保存;
第四,按START键运行。
第五,ACSl80仪将30/Il样本液装入反应杯中;将100u1 IgE lite试剂与450ul总IgE固相试剂加入,并于37℃环境中温浴7.5min;用去离子水冲洗、分离反应相;加入300tA试剂1与试剂2以启动光化学反应,反应完成后自动报告结果(详情见各仪器系统操作说明)。
正常参考值: 0—378U/m1
注意事项:
1.试剂取出应充分混匀。
2.样本应充分凝固,无纤维、气泡及其他物质。
3.样本检测应在8h内完成,否则应置2~8℃保存。
4.48h内不检测,应将样本于一20℃冻存,且只能冻融1次。
5.若试剂室温放置超过40h应弃之不用,不使用任何过期试剂。
[临床意义] IgE升高,主要见于过敏性疾病。在感染性疾病中,如寄生虫感染、支气管—肺曲霉菌病也可升高。
这个免疫化学的实验临床意义很大,平时有很多的过敏性的疾病,他的IgE值也会升高。我们可以看到,当感染了类似寄生虫,支气管—肺曲霉菌病时,它也是升高的。
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