Waters Q-tof 2 LCMS-MS质谱仪的特点

1.仪器简介     

    Waters/Micromass Q-tof 2 LCMS-MS电喷雾四极杆飞行时间串联质谱仪是英国Micromass公司（现为Waters公司）生产的串联质谱仪Q-TOF系列的第二代。

    Q-tof  2一级质谱是四极杆，主要起选择离子的作用，二级质谱为飞行时间质谱，是该仪器的主要质量分析器。

专利设计的Z-spray电喷雾离子源（electrospray ionization ,ESI），有效防止离子源和仪器污染，防止热裂解，广泛适合HPLC各种分离条件并提高灵敏度。

源隔断阀可有效保护真空系统和检测器，易于清洗离子源而无需放空仪器。

配备有纳升喷雾源和毛细管液相色谱，可以进行离线的手动测序和自动化数据依赖分析（Data dependent analysis, DDA），大大提高了仪器的灵敏度和分析能力。纳升电喷雾串联质谱（nanoESI-MS/MS）是指离子源喷雾速度为20-40nl/min和喷雾形成的雾滴直径在纳米水平的电喷雾质谱，已经发展成为鉴定分析微量蛋白质的重要工具。2-3ml样品能够连续喷雾2小时，手动最多可测定10个肽段的序列。对蛋白质的鉴定率可达90%。

2. 仪器特点及主要功能

2.1 高灵敏度、高分辨率、高质量准确度 

Q-TOF2是高性能的串联质谱仪，具有高灵敏（20fmole），高分辨率（FWHM，>10000）和高质量准确度（内标校正<5ppm）的优点，因此蛋白质等大分子的分子量测量误差在0.01%，一般的质谱无可比拟.

2.2强大的De novo 测序功能     

Q-TOF2的最强大功能是能够对蛋白质进行测序，是蛋白测序的一种新方法，是传统蛋白质N端测序，即Edman降解测序的有利补充。它的优点是样品用量少，仅fmol的样品就能够测序。另一个重要的优点是能够测N端封闭的蛋白质序列（Edman降解不能）。与Edman降解测序不同的是Q-TOF2不是对整个蛋白质进行测序，而是首先将蛋白质通过酶切（一般为胰蛋白酶），然后对其酶切肽段进行测序，因此测定的是蛋白质中任何部分的序列，不一定是N端或C端序列。ESI-MS/MS由于能测定肽段的序列，因此鉴定蛋白质的成功率很高。一般测定一个肽段的序列就可以鉴定一个蛋白质，测定2~3个肽段的序列就能十分肯定地鉴定一个蛋白质。应用Q-TOF2最多可测分子量3000Da的肽段序列。最适宜测序的肽段的分子量范围为800~2000Da。

2.3适合不稳定化合物的分子量测定和元素组成分析

    由于ESI是最软的电离技术，在一定的电压下它不会使样品分子产生碎片，因此易于得到不稳定化合物的分子离子峰，与TOF的高分辨相结合，可以测定其元素组成。

2.4适合于混合物的分析     

由于ESI是最软的电离技术，不易使样品分子裂解，因此对于小分子的样品，根据ESI谱图可确定样品的组成成份有几种，通过串联质谱则可得到其结构信息。

    由于Q-TOF2的一级质谱四极杆有选择离子的作用，因此其另一个最大优点是可以对混合蛋白质进行鉴定，对样品纯度的要求不高，不经液相分离可对6个蛋白质的混合物进行鉴     Q-TOF2与CapLC联用，可以进行自动化DDA分析，可以进行“shot-gun”的蛋白质组学研究和多肽组学研究。