加载中…
个人资料
  • 博客等级:
  • 博客积分:
  • 博客访问:
  • 关注人气:
  • 获赠金笔:0支
  • 赠出金笔:0支
  • 荣誉徽章:
正文 字体大小:

细胞培养问题:DMEM 和RMPI1640

(2018-02-02 11:23:16)
标签:

杂交瘤细胞

细胞培养

分类: 抗体文章

原文地址:jinpanxie微博

http://s9/bmiddle/002zjnA7zy7hR8wJDw4b8&690和RMPI1640" TITLE="细胞培养问题:DMEM 和RMPI1640" />

细胞培养问题:DMEM 和RMPI1640的不同,可以互相换用吗?

DMEM是在最低必需培养基(Eagle"s minimum essential medium MEM)的基础上发展而来的,分高糖型(含葡萄糖4500mg/L)和低糖型(含葡萄糖1000mg/L)两种,高糖型适用于生长较快,附着性较差的肿瘤细胞,例如杂交瘤中骨髓瘤细胞,DNA转染的转化细胞等的培养。
RPMI 1640 培养液最初为培养小鼠白血病细胞而制备。开始的配方特别适合悬浮细胞的生长,主要针对淋巴细胞,后经过几次改良从RPMI 1630、RPMI 1634,而至RPMI 1640。其组成较为简单,但可以适应很多种类细胞的生长。是目前应用最为广泛的培养基之一。 

有几点建议可供参考:

(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。

(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。

(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640 

(4) 用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。

当然你可以一部分细胞用DMEM养,一部分用1640养养看,如果用1640没问题,再换也不迟。有些细胞对培养基的类型要求不严格,有时候刚好1640用完了,用DMEM养也无大碍。

细胞培养问题:DMEM/RMPI1640培养基由红色变成紫红色

DMEM培养液有关PH值的问题

培养基中加碳酸氢钠的目的,是为了在二氧化碳培养箱中平衡培养基中的PH值。对于GBICO的DMEM培养基,3.7g是对应二氧化碳培养箱的二氧化碳浓度设定在10%,而5%的则对应的是1.85g碳酸氢钠。暴露在空气中的培养液,因为大气中二氧化碳的浓度很低,液体中的二氧化碳会气体分压高于大气,因此会逐渐溢出,浓度逐渐降低,液体的PH值也逐渐升高,这就是它变成紫红色的原因。如果想将液体的PH值平衡到配置时的数值,可以将其放置在二氧化碳培养箱中(注意培养箱二氧化碳浓度的设定和碳酸氢钠质量之间的对应关系)至少2小时,你会发现,培养液的颜色恢复到配置时过滤后的水平。 

分装瓶中培养基颜色的变化是比较有规律的。一般新配置的颜色正常,在多次开盖,培养液接触空气的时间较长后,颜色会逐渐变成紫红色(速度和是否加hepes有关)。有一种情况,就是在分装瓶中还剩少量培养液时,培养液也容易变成紫红色,因为分装瓶中有较多的空气。

对于RMPI1640培养基,也存在上述现象。

更多细胞培养与单克隆制备知识请点击:杂交瘤单抗制备流程介绍

0

阅读 收藏 喜欢 打印举报/Report
  

新浪BLOG意见反馈留言板 欢迎批评指正

新浪简介 | About Sina | 广告服务 | 联系我们 | 招聘信息 | 网站律师 | SINA English | 产品答疑

新浪公司 版权所有