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Protein A、Protein G、Protein A+G、Protein L

(2011-11-16 15:42:03)
分类: 精品推荐

Protein A、Protein G、Protein A+G、Protein L

Protein A

蛋白A (Protein A) 来源于金黄色葡萄球菌的一个株系,它含有5个可以和抗体IgG分子的Fc段特异性结合的结构域。蛋白A作为亲和配基被偶联到琼脂糖基质上,可以特异性的和样品中的抗体分子结合,而使其他杂蛋白流穿,具有极高的选择性,一步亲和层析就可达到超过95%的纯度。1个蛋白A分子至少可以结合2IgG。蛋白A也可以结合另一些免疫球蛋白,如用于某些种属的IgAIgM的纯化。
 

Protein G

      蛋白G是一种源自链球菌G族的细胞表面蛋白,为三型Fc受体。其通过类似于蛋白A 的非免疫机制与抗体的Fc段结合。像蛋白A 一样,蛋白G可以与IgGFc 区域特异性结合,不同的是,Protein G Sepharose 可以广泛、更强地结合更多类型的IgG, 多克隆IgG及人IgG,同时血清蛋白结合水平更低,纯度更高,配基脱落也相对更低。此外,蛋白G还可以和某些抗体的Fab F (ab’)2 段结合。

 

Protein A+G

Protein A+G Agarose适合于免疫沉淀所有Protein A AgaroseProtein A+G Agarose单独可以免疫沉淀的抗体,包括小鼠IgG1IgG2aIgG2bIgG3IgArat IgG1IgG2aIgG2bIgG2c,兔IgG和山羊多抗,以及人IgG1IgG2IgG3IgG4

 

Protein L

是厌氧性细菌大消化链球菌(Peptostreptococcus magnus)的一种细胞壁成分,是一种能和广泛的免疫球蛋白相结合的蛋白质,Protein L只与抗体的k链结合而不会影响抗体的抗原结合位点,这一特性使其与蛋白A或蛋白G相比,能更广泛地结合各种来源及亚类的抗体,包括人、小鼠、大鼠、兔和鸡,但是它并不结合牛、山羊或绵羊来源的免疫球蛋白。可以用于从添加BSAFCS的培养液中纯化单抗。

 

蛋白A、蛋白G是微生物来源的天然蛋白质,可以和哺乳动物的免疫球蛋白结合,基于这一特性,蛋白A、蛋白G的主要应用是在:

    1 纯化抗体:将这些蛋白偶联于支持物上,提供了纯化抗体的有效方法。
    2
免疫沉淀(immunoprecipitation):利用蛋白A、蛋白G和免疫球蛋白的Fc段的结合,把Ag-Ab复合物分离出来,从而达到从蛋白复合物中分离出特定蛋白进行下一步的研究分析或者研究蛋白质-蛋白质之间的相互作用。
    3
去除或减少非特异性背景:如免疫沉淀技术中在加入特异性抗体前加protein A/G beads到细胞裂解液中,以减低背景。

 

免疫球结合蛋白的一般特性

 

 

重组蛋白A

重组蛋白G

重组蛋白 A/G

重组蛋白L

 

天然来源

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)

链球菌(Streptococcus)

N/A

大消化链球菌(Peptostreptococcus magnus)

 

重组产品来源

E. coli

E. coli

E. coli

E. coli

 

分子量

44,600

31,600

50,460

35,800

 

SDS-PAGE

45 kDa

32 kDa

40-45 kDa

36 kDa

 

免疫球蛋白Ig结合位点数

4

2

6

4

 

白蛋白结合位点

No

No

No

No

 

最适结合pH值

8.2

5

5-8.2

7.5

 

Ig目标结合区

Fc

Fc

Fc

kappa轻链

 

 

 

Species/ Subclass

 Protein G

 Protein A

MONOCLONAL

Human

IgG 1

 ++++

 ++++

IgG 2

 ++++

 ++++

IgG 3

 ++++

 ---

IgG 4

 ++++

 ++++

Mouse

IgG 1

 ++++

 +

IgG 2a

 ++++

 ++++

IgG 2b

 +++

 +++

IgG 3

 +++

 ++

Rat

IgG 1

 +

 ---

IgG 2a

 ++++

 ---

IgG 2b

 ++

 ---

IgG 2c

 ++

 +

POLYCLONAL

Rabbit

 +++

 ++++

Cow

 ++++

 ++

Horse

 ++++

 ++

Goat

 ++

 ---

Guinea pig

 ++

 ++++

Sheep

 ++

 +/-

Pig

 +++

 +++

Rat

 ++

 +/-

Mouse

 ++

 ++

Chicken

 +

 ---

Human IgG

 ++++

 ++++

Human IgM

 +

 ---

Human IgE

 +

 ---

Human IgA

 +

 ---

备注:---weak or no binding      ++++(strong binding)

 

联系电话:15727041409                                     网址:www.shengyabio.com

 

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