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X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent 是专为高效转染真核细胞而研发的转染试剂,能显著提高多种难转细胞的转染成功率。
提高转染效率:针对难转细胞和昆虫细胞系转染进行了优化设计
高性能的易用试剂:不含任何动物来源成分, 在含血清培养基中依然保持高活性
增加实验通量:简单快速的操作流程
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图1:X-tremeGENE HP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENE HP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENE HP,导致存活细胞量减少。
应用X-tremeGENE HP 可在下列难转染细胞中获得高效转染结果:
原代细胞 (图2)
人和鼠的间叶干细胞 (图3)
难转细胞和悬浮细胞,如K562和RAW细胞 (图4)
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图2:X-tremeGENE HP可高效转染人原代纤维母细胞。原代纤维母细胞分离自人包皮组织,使用4μl X-tremeGENE HP和1μg GFP编码的质粒DNA在6孔板中进行转染。转染后48h观察GFP表达情况,左图为GFP表达的荧光成像,右图为相同区域的明视野成像。
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图3:X-tremeGENE HP对难转细胞系的转染效果优于脂质体转染方法。应用GFP编码的质粒对人/鼠间充质干细胞进行转染。XHP 3:1表示用X-tremeGENE HP及相应的转染试剂(μl): 质粒DNA (μg)比例进行转染。
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图4:X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent对难转细胞的转染结果。在含血清培养基中对4种难转染细胞系进行转染,每种试剂进行3次重复试验。通过GFP表达细胞与总细胞数的比例计算转染效率。
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图5:X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent转染后细胞的高存活率。通过X-tremeGENE HP和脂质体转染方法转染HeLa细胞。细胞毒性通过LDH方法检测(罗氏LDH Cytotoxicity Detection Kit)。X-tremeGENE HP转染试剂显示了很低的细胞毒性。图中标明了不同试剂说明书各自建议的转染试剂体积与DNA质量比例。
在常见细胞系的瞬时转染实验中,X-tremeGENE HP 能获得比脂质体转染方法多2.5倍的蛋白表达产量。
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图6:将CHO-S和HEK293F细胞接种到2ml培养基/孔的板中,使用X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent和脂质体方法进行转染。转染后48h检测虫萤光素酶表达情况。X-tremeGENE HP转染后,细胞获得高效蛋白表达。
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