培养板的选择

除96孔板外，24孔板、12孔板均可用于CCK8检测，只是采用24孔板、12孔板CCK8的用量较多，使用量仍为培养基体积的1/10。

减少CCK8加样的误差：

避免CCK8在枪头和孔壁上的残留。

可在加样前用培养基稀释CCK8试剂并混匀后加样。

制作标准曲线的方法：

取已知细胞数量的细胞悬液加入到培养板中。

用培养基依次等比例稀释成一个系列浓度的细胞悬液。

细胞培养一段时间后加入CCK8试剂孵育1-4小时。

酶标仪进行测定，以细胞数量为X轴，OD值为Y轴，就可以制作标准曲线。

CCK8加入后最佳的检测时间：

CCK8试剂和细胞内的脱氢酶反应是一个循环反应，随着时间的增加，颜色不断加深，OD值也会不断增加，但细胞数量却没有变化。

一般情况下，建议在确定最佳的实验条件（合适的时间、合适的OD值）后，把加入CCK8试剂后的培养时间固定下来，以后在同样的培养时间点进行检测。

终止CCK8显色的几种方法（96孔板）：

每孔加入10ul 0.1M HCl溶液。

在显色反应后，将培养板放入4度冰箱内。

每孔加10ul 1%（W/V）的SDS溶液。

注：反应停止后，应在24小时内测定。

注：转载自（乐研生物 Lovelyresearcher.com）