准备：

1、PEG/LiAc 溶液（现配现用，各组分可先配好长时间常温保存）

   8ml 50% PEG3350+1ml 10xTE+1ml 10xLiAc 总10ml

2、诱饵质粒线性化片段（pAbAi-cis-elemen）

3、酵母感受态（Gold）

4、carry DNA（使用前沸水煮5min，立即置于冰上1min，重复两次）

转化体系：

诱饵质粒线性化片段（pAbAi-cis-elemen） 0.5微升（我一般用5微升，片段电泳亮度与marker亮度大致相同）

Carry DNA                              5.0微升

酵母感受态                             50微升

PEG/LiAc                               500微升

cDNA文库筛选体系：

文库质粒：5微升

Carry DNA：10微升

酵母感受态：50微升

PEG/LiAc：500微升

该体系共配置20个，总使用文库质粒100微升。（根据个人文库浓度设定用量，分开转化效率高，也可以一个体系加100微升文库质粒）

转化反应：

    1、准备1.5ml离心管（按上面顺序加）

    2、轻柔混匀

    3、30℃静置30min，每十分钟混匀一次。

4、加20微升DMSO混匀，42℃水浴15min，每5min混匀一次。

5、高速离心 12000rpm，15s

6、弃上清，加1mlYPDA重悬。

7、30℃，90min，恢复培养。

8、高速离心15s

9、弃上清，1ml 0.9%NaCl，用枪轻柔重悬。

10、涂100微升于10mm SD/-ura平板上。（1:10,1:100,1:1000，我一般只稀释10倍，并且同时涂含有100、200、400ng/ml AbA平板，这样做比较省事，如果含AbA的平板上没有菌落，SD/-ura上有菌落，我还是建议挑取菌落，用SD/-ura液体培养基摇菌，稀释到OD600=0.002后，涂不同浓度AbA平板进行检测，这样比较保险）

11、30℃培养，2-4天。