食品和水中肠球菌检验方法 平板计数法和最近似值测定法

1. 范围  食品和水中肠球菌平板计数的检验方法适用于生活用水,生产加工用水及食品中肠球菌的检验。

2. 引用标准

SN/T 1933.1-2007

3设备和材料

电子天平: 感量为0.001g

恒温水浴箱

恒温培养箱

均质器

振荡器

移液管：容量1ml，10ml

培养皿

4．培养基和试剂

叠氮化葡萄糖肉汤

肠球菌肉汤

KF链球菌琼脂

肠球菌琼脂

胆汁七叶苷琼脂

脑心浸液肉汤

含6.5%氯化钙脑心浸液肉汤

脑心浸液琼脂

缓冲蛋白胨水

5．样品制备

5.1 水及液体饮料： 污染程度低的水及液体饮料可直接进行检验；污染程度严重的水及液体饮料吸取25ml样品，加入225ml缓冲蛋白胨水中，充分混匀，制成1:10样品匀液。

5.2 固体或半固体样品： 无菌操作提取25g样品放入装有225ml缓冲蛋白胨水的均质杯中，以8000r/min均质1min~2min,制成1:10样品均液。

6. 检验步骤与计数

接种和培养：

稀释也加入培养皿后每个稀释度做两个平板，把保持       的KF琼脂或或肠球菌琼脂15ml，倾入培养皿内，使样液与培养基充分混合。 KF平板置36度   培养48h    2h；肠球菌琼脂平板置35度   培养

菌落形态观察

肠球菌属细菌在KF平板上形成暗红色至粉红色菌落，边缘整齐，在肠球菌琼脂平板上形成带棕色环的暗黑色菌落。用灭菌接种针从每个KF平板或肠球菌平板挑取10个典型菌落，进一步做确证试验。