好多朋友不了解实时荧光定量PCR的后续数据的处理，而我个人与这一技术接触一年了，今天给大家介绍一下实时荧光定量PCR数据处理思路。http://s5/middle/6e35d907tbf7e837aa3ba&690
这是某种微生物标准品得到的一条标准曲线，这是一条直线，但不是一次方程，是以10为底数的对数方程。它的横坐标是要计算微生物的质量，纵坐标是对应的荧光值。“Slope”是曲线的斜率，“Y-inter”是在纵坐标的截距，但这个截距是横坐标“1”对应的截距，R2是曲线的线性相关值，Eff%是扩增效率。
计算过程大致如下：
Y-Inter=Slope*㏒10X
Y-Inter=Slope*㏒10X
Y-Inter=Slope*㏒10X
Y-Inter=Slope*㏒10X
X*10-9=m
Bp*660=M
m÷M*R*K=结果
X*10-9=m
Y为要测样本的CT值，带入第一个公式得到X，X为样本DNA质量单位为ng,Bp为待测微生物碱基对数，碱基对数乘以660为此微生物相对分子质量M，R为阿伏伽德罗常数，K相关的系数，不同的试验K值不同，比如说试验过程中样本稀释了对少倍，去了多少量等加以确定的。
Bp*660=M
m÷M*R=结果
X*10-9=m
Bp*660=M
m÷M*R=结果
X*10-9=m
m÷M*R=结果
Y-Inter=Slope*㏒10X
X*10-9=m
m÷M*R=结果
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(2012-05-20 23:13:13)