转载:病毒作为载体是如何携带目的基因进入受体细胞?
(2011-08-02 20:38:33)
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杂谈 |
基因工程中的“分子运输车”除质粒外,还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。教材对质粒的分子结构和工作原理进行了详细的描述,那么病毒是如何携带目的基因导入受体细胞的呢?下面就以λ噬菌体为例,简要介绍其表达载体的构建。
迄今已经定位的λ噬菌体的基因至少有61个,其中有一半左右参与了噬菌体生命周期的活动,这些基因所在区段是噬菌体生长繁殖所必需的,在表达载体构建中为不可替代区;而另一部分基因对于噬菌体生长周期不是必需的,这些基因所在区域就称为可替代区,如果用外源基因取代之后,并不影响噬菌体的生命功能,正是这一特点构成了λ噬菌体作为外源基因表达载体的基础。野生型λ噬菌体DNA必须经过改造才能成为理想的载体,其构建过程主要有:①删除基因组中非必需区,建立外源DNA片段的替换点,增加承载外源DNA片段的容量。②在非必需区内插入或替换选择的标记基因和目的基因。③建立重组λDNA分子的体外包装系统,使之有效地感染受体细胞。简而言之,将目的基因插入或替换进入病毒基因组的可替代区,再利用病毒的侵染性,将目的基因导入受体细胞,这就是病毒作为“分子运输车”的基本机理。