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引物使用说明

(2010-08-17 10:31:17)
标签:

杂谈

分类: 实验技术
1.       我们提供的合成报告单上的Oligo序列是该Oligo合成时由DNA合成仪控制的电脑即时打印的,所合成的Oligo序列与此序列完全一致,如果该序列与您的序列不同,请您立即与我们联系。

  2.       我们生产的Oligo合成产品全部经过PAGE纯化,纯度保证,我们不向用户提供C18脱盐等低级纯化规格的产品。

  3.       我们提供的Oligo是通过自外分光光度计在260nm波长下来定量的。1OD单位的冻干粉Oligo的质量相当于33μg。每条Oligo的分子量和每ODnmol数可以从本报告单上直接获得,分子量的计算公式为MW(#A×313.21) + (#G×329.21) + (#C×289.18) + (#T×304.20) - 61.96 (#AA的个数,其余相同),也可以用单个核苷酸的平均分子量法近似计算:分子量=碱基个数×324.5 (每个核苷酸的平均分子量)

举例:如果您拿到一管标着2OD20个碱基的Oligo,按平均分子量法计算:

分子量=20×324.56490

质量数=2×33μg66μg           纳摩尔数=66μg/64900.010μmol10nmol

若您需要溶解为10μM的溶液,只需加入1mlddH2OTE充分溶解即可。

  4.       经过真空冷冻干燥的Oligo DNA是呈薄膜状或粉末状附在离心管中,请适当离心后小心开启,以免飞扬丢失。并请加入适量的ddH2O合上管盖充分震荡使其溶解。由于引物的量也是PCR反应成功与否的一个重要因素,所以,如果条件允许的话最好溶解后用分光光度计定量。 

  5.       我们提供的Oligo5’端和3’端均为羟基,可直接用于PCR。如果需要标记磷酸基团必须另作处理,我们也可以提供标记服务。

  6.       荧光修饰的产品,如FAMHEXTAMRA等标记的Oligo因对光敏感,需避光保存。 

  7.       常用的兼并碱基代码:

M=A/C  R=A/G  W=A/T  S=G/C  Y=C/T  K=G/T  V=A/G/C  H=A/C/T  D=A/G/T  B=G/C/T  N=A/G/C/T

  8.       此产品请-20干燥保存。

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