Triton X-100
(2010-07-26 09:11:37)
标签:
曲拉通100杂谈 |
分类: 试剂常识 |
分子式:C14H22O(C2H4O)n
用途:Triton X-100是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂),常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白。
性质:
1. Triton
X-100对细菌等微生物没有杀伤作用。
2. Triton X-100在紫外波段下有光吸收(lambda max = 275 nm and 283 nm in
methanol),因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量。
3. Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic
去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象。
4.Triton
X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含
5. Triton X-100非常稳定,密封避光 +2-8℃条件下可以长期保存。
6.Triton X-100是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体。
7. Triton X-100的密度为1.07 g/ml,pH6.0-8.0(5%的溶液)。
8. Triton X-100可以高压灭菌。
9. 用Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题。
10. 蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性。
11. 可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161
cartridges 来去除Triton X-100 。
配制:
免疫细胞化学中Triton X-100常用浓度为1%和0.3%,其中1%的Triton X-100常用于漂洗组织标本,0.3%的Triton X-100则常用于稀释血清,配制BSA等。但通常是先配制成30%的Triton X-100储备液,临用时稀释至所需浓度。
30% Triton X-100的配制:
试剂:Triton X-100 28.2ml
0.1mol/L PBS(pH7.3)或0.05mol/l TBS(pH7.4) 72.8ml
配制方法:取Triton
X-100及PBS(或TBS)混合,置37℃~40℃水浴中2~3h,使其充分溶解混匀。用前取该储备液稀释至所需浓度。