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DNA电泳Marker条带模糊的原因

(2011-06-27 07:59:31)
标签:

杂谈

分类: 科研总结

1.       Marker质量问题:

  1. MakerDNA酶污染,已经部分降解。
  2. 如果是自制的marker,可能粘性末端重新结合。煮沸3-6分钟,冰水骤冷,可使之重新分开。


2.  
凝胶质量问题:

  1. 凝胶质量不好。
  2. 配胶的水不干净。
  3. 胶不均匀,煮沸的时候要多煮沸一段时间(4-5分钟)。
  4. 凝胶放置时间太久,被部分降解。
  5. EB浓度太高,降低胶中EB浓度到0.1-0.2ug/ul
  6. 凝胶被DNA酶污染。

 

3.  电泳问题:

  1. 电泳的电压太高,不要超过20V/cm
  2. 电泳时间长,产热多,导致胶部分融化。
  3. 电泳仪电压不稳。
  4. 电泳缓冲液陈旧。1X TAE100V不能使用超过50分钟。

 

其中,红色标记的更为常见。

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