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试题出现的疑问：有一试题认为逆转录的过程不需要DNA聚合酶，但也有资料认为RNA通过逆转录形成DNA单链，然后通过DNA聚合酶催化形成DNA双链。要解决这个问题就要对逆转录酶进行深入的了解。

研究的结果：不需要DNA聚合酶，因为逆转录酶有DNA聚合酶活性。

一、逆转录酶的发现

在1970时，当科学家霍华德·马丁·特明和戴维·巴尔的摩两人各自都从酵素中发现反转录的反应，将此命名为逆转录酶，此种反转录的机制才被当时的主流接受。

逆转录酶首先是由霍华德·马丁·特明在劳氏肉瘤病毒中发现的，并且1970在麻省理工学院由戴维·巴尔的摩独立从两种RNA肿瘤病毒：R-MLV以及再一次劳氏肉瘤病毒中分离出来。由于这些成就，两人在1975年共同获得了诺贝尔生理学或医学奖。

后来发现，逆转录酶不仅存在于某些RNA病毒，也存在于哺乳动物的胚胎细胞和正在分裂的淋巴细胞。

二、逆转录的简单过程

逆转录酶的作用是以dNTP为底物，以RNA为模板，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA3'-末端上，按5'→3'方向，合成一条与RNA模板互补的cDNA单链，它与RNA模板形成RNA-cDNA杂交体。随后又在逆转录酶的作用下，水解掉RNA链，再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此，完成由RNA指导的DNA合成过程。

三、逆转录酶的生理功能

逆转录过程由逆转录酶催化，该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶，即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA（ cDNA）。

大多数逆转录酶都具有多种酶活性，主要包括以下三种活性。

1．DNA聚合酶活性

以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为赖氨酸的tRNA，在引物tRNA 3'－末端以5'→3'方向合成DNA。

2．RNase H活性（RNA酶）

由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子，将由RNase H从RNA 5'端水解掉RNA分子。

3．DNA指导的DNA聚合酶活性

以反转录合成的第一条DNA单链为模板，以dNTP为底物，再合成第二条DNA分子。

除此之外，有些逆转录酶还有DNA内切酶活性，这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。

四、研究意义

逆转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用，它已成为一种重要的工具酶。用组织细胞提取mRNA并以它为模板，在逆转录酶的作用下，合成出互补的cDNA，由此可构建出cDNA文库，从中筛选特异的目的基因，这是在基因工程技术中最常用的获得目的基因的方法。