rhGH干预GHR基因差异表达人胃癌细胞增殖及

JAK2-STAT3通路机制

冉 刚¹  林 岩²  曹 鹏³  蔡雪婷³   李苏宜^1*

1． 东南大学附属中大医院；2．南京医科大学第二附属医院；3． 江苏省中医药研究院分子与细胞生物学实验室

摘要：目的：运用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制人胃癌MGC-803细胞生长激素受体(GHR)基因表达， GHR不同表达状态下观察基因重组人生长激素（rhGH）对MGC-803细胞生物学效应变化，探讨JAK2-STAT3通路机制。方法：设计特异性siRNA，构建对人GHR真核质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo-siGHR，脂质体法转染干扰载体和空载体人胃癌MGC-803细胞，G418筛选稳定转染细胞株；Western Blot检测GHR蛋白表达。rhGH干预细胞株，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测其生长率，ELISA法测细胞培养液IGF-1水平，流式细胞技术测细胞增值状况(PI)及周期分析，Western Blot法测JAK2-STAT3通路节点蛋白变化。结果：转染空载体细胞株GHR蛋白表达量与亲本细胞株差异不明显（P>0.05），转染干扰载体株较亲本细胞株GHR 蛋白下降56%。分别以 0 ng/ml，150ng/ml和300ng/ml浓度rhGH培养细胞株，亲本株和转染空载体细胞株增殖加速，PI增高，G2/M期细胞含量增加，且胞内p-JAK2,p-STAT3含量增加；转染干扰载体细胞株未出现类似改变。结论：siRNA技术抑制人胃癌MGC-803细胞GHR基因表达，有效降低MGC-803细胞对rhGH促增殖活性反应性，机制与降低JAK2-STAT3信号转导通路节点基因功效有关。

关键词：重组人生长激素；生长激素受体；胃癌；JAK2-STAT通路。