血清饥饿-serum-starved
(2014-05-04 09:35:35)
标签:
细胞培养 |
血清饥饿
"serum-starved"指是的培养基中不含加血清,有人译为”血清饥饿“。这个操作的目的是使细胞同步化分裂。
原理
细胞生长需要生长因子的刺激,在正常情况下,细胞培养需要放一定量血清,这些血清中含的生长因子是使细胞繁盛分裂增殖的重要信号。如果降低培养液中的血清浓度,比如从10%降到无血清或2%,使所培养的细胞因缺乏血清中的生长因子而不能分裂,使细胞周期G0期同步化,N小时后再加入血清,细胞就开始同步生长分裂了。
作用
实验中进行血清饥饿是很必要的,比如在给予刺激因素或者药物的时候,可以避免细胞所处的状态不同造成实验的误差,换句话说就是让所有的细胞都处于同一条起跑线上。
此外,应用细胞因子时,由于血清中含有多种生长因子,所以会对实验结果有干扰。因此在研究细胞因子作用时,在整个实验的过程中,最好都保持无血清状态。如果细胞不能耐受无血清培养,则可加少量血清以保持细胞不会发生凋亡,此时血清浓度由预实验来决定。
血清饥饿的时间
血清饥饿没有固定的血清浓度和时间,有些需4个小时,有些可能要过夜,具体的可以检索文献,或者要自己做预实验摸索出最佳饥饿时间。
总结:
血清饥饿有两个方面的作用
细胞同步化,排除不同状态细胞的影响;
排除血清里的生长因子对细胞的影响。
案例
研究药物对L02的影响
L02细胞加入培养板后,孵育24h后,血清饥饿24h,然后将细胞分为6组,加入相应的药物。
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