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DNA甲基化一些基本知识总结

(2015-06-12 16:13:46)
标签:

健康

1、  什么是DNA甲基化

DNA甲基化是一种发生在DNA序列上的化学修饰,可以稳定地在转录及细胞分裂前后遗传,DNA甲基化是重要的表观遗传代码。

在哺乳动物中,大约60%-90%的CpG二核苷酸是甲基化的。CpG中的p代表链接脱氧胞嘧啶和脱氧鸟嘌呤核苷的磷酸基团。

在哺乳动物细胞中,DNA甲基化主要发生在CpG二核苷酸中胞嘧啶的第五个碳原子上,这样的胞嘧啶也叫做5-甲级-胞嘧啶。

DNA甲基化影响转录的机制:DNA甲基化阻碍转录因子的结合,DNA甲基化识别染色质标记,DNA甲基化募集其他蛋白引起染色质沉默,DNA甲基化影响核小体定位。

2、CpG岛的定义

CpG岛的定义,长度最短为200bp,GC含量至少50%,CpG O/E 最小0.6,位于基因启动子上。

3、  CpG岛的生物信息预测

方法一、EMBL→Services →A to Z → EMBOSS tools →CpGplot

(http://www.ebi.ac.uk/Tools/seqstats/emboss_cpgplot/)

Copy入待研究序列 →submit

http://s16/mw690/001HHwRSzy6T0wTQisv7f&690
http://s16/mw690/001HHwRSzy6T0wW0y51df&690


CPGPLOT islands of unusual CG composition

EMBOSS_001 from 1 to 4000

 

     Observed/Expected ratio > 0.60

     Percent C + Percent G > 50.00

     Length > 200

 

 Length 637 (2783..3419)

 

 

第二种方法:Softberry CpG Finder Program

(http://linux1.softberry.com/berry.phtml?topic=cpgfinder&group=programs&subgroup=promoter)

 

4、  甲基化的预测

DNA甲基化和一些DNA序列上的特征相关,如重复序列Alu可以导致DNA甲基化的蔓延,而转录因子Sp1的绑定可以阻止DNA甲基化的蔓延【参考文献12】

http://s1/mw690/001HHwRSzy6T0wYNxcI50&690

影响DNA甲基化的四种显著的组蛋白修饰

http://s4/mw690/001HHwRSzy6T0x2yucje3&690

5、  甲基化检测方法

①   亚硫酸氢钠法(sodium bisulfite)

②   甲基化敏感的限制性内切酶法

③   基因表达阵列法

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