1、细胞计数

①计数板准备：用酒精清洗计数板表面及盖玻片，滤纸擦干酒精

②细胞悬液准备：用培养基将细胞悬液稀释到合适的浓度，一般高于10⁴ /ml，细胞要用胰酶充分消化，制成单个细胞悬液。

③加样：将菌悬液摇匀，用枪头吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。

④计数：由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。按照数上不数下，数左不数右的原则进行计数。

⑤计算：每大格的长宽均是1mm，高度为0.1mm，则体积为0.1mm³，N大格细胞总数/N*10⁴即为每毫升细胞数。

2、台盼蓝染色

①制备单个细胞悬液

②向细胞悬液中加入0.4%的台盼蓝溶液，使台盼蓝终浓度为0.04%

③在三分钟内用细胞计数板分别计数活细胞和死细胞，死细胞被染成蓝黑色