化学发光的技术分类
(2020-06-22 10:04:35)
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化学发光的技术分类
技术分类是根据发光体系也就是发光剂的不同进行分类,可分为:间接化学发光、电化学发光、直接化学发光、光激化学发光。今天我们主要讲讲前三类目前主流的发光技术。
1、间接化学发光
·他是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体,在与待测标本中相应的抗原(或抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤后,加入底物(也就是发光剂),酶催化和分解底物发光,由光量子阅读系统接收,光电倍增管将光信号转变为电信号并加以放大,再把它们传送至计算机数据处理系统,计算出测定物的浓度。
优势:发光过程中作为标记物的酶基本不被消耗,发光信号强而稳定,且发光时间较长;检测方式简单、成本较低。
关于间接化学发光,我们要明白以下三点:1、是用酶进行标记抗原或抗体;2、标记复合物反应过程中加入底物也就是发光剂后,经催化和分解产生发光;3、光信号转化为电信号,并由计算机进行处理和换算得到实验结果。代表厂家:贝克曼、迈瑞、西门子、安图等。
2、直接化学发光
它是用吖碇酯等直接标记抗体(或抗原),与待测标本中相应的抗原(或抗体)发生免疫反应后,形成固相包被抗体-待测抗原-吖碇酯标记抗体复合物,这时只需加入氧化剂过氧化氢和氢氧化钠形成碱性环境,吖碇酯在不需要催化剂的情况下分解、发光。
优势:试剂稳定性好,易于保存;标记物为小分子,对标记的抗原/抗体的空间位点几乎不造成影响;本底低,灵敏度好,结果稳定。代表厂家:雅培、新产业、索灵等。
关于直接化学发光,我们需要明白以下三点:1、用压吖啶酯等标记物标记抗原或抗体;2标记复合物反应过程中加入氧化剂过氧化氢和氢氧化钠形成碱性环境进行分解和发光。;3、光信号转化为电信号,并由计算机进行处理和换算得到实验结果。
3、电化学发光
是以电化学发光剂三联砒锭钌标记抗体(或抗原),以三丙胺(TPA)为电子供体,在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应,它包括电化学和化学发光两个过程。
优势:可控的反应体系快速检测时间高精密度和高灵敏度宽广的检测范围。
关于以罗氏为代表的电化学发光,我们需要明白以下三点:1、用电化学发光剂标记抗原或抗体;2、电化学反应过程中因电子产生转移而出现化学发光;3、光信号转化为电信号,并由计算机进行处理和换算得到实验结果。