甲状腺机能亢进的诊断主要基于发现相应的临床症状、触诊到甲状腺结节和血清T₄浓度升高。20世纪80年代人们对本病的认识增加，80年代末商业诊断实验室把血清T₄作为猫生化检查的常规项目之一，这给兽医提出一个鉴别正常、轻度或潜在甲状腺机能亢进猫的挑战。潜在甲状腺机能亢进指猫出现轻度临床症状，颈下部可触诊到小结节，但血清T₄浓度位于参考值上半部。轻度甲状腺机能亢进猫血清T₄浓度的随机波动进入参考值，或由于并发非甲状腺疾病引起血清T₄下降都会导致血清T₄检测结果无意义。在诊断轻度或潜在甲状腺机能亢进猫时，常需要进行其它项目的检测（例如，血清fT₄浓度、放射性核素甲状腺扫描）以确诊。

基础血清T₄浓度　甲状腺机能亢进和无甲状腺疾病猫进行区分时，随机血清T₄浓度的测定是十分可靠的。血清T₄浓度异常升高强烈支持甲状腺机能亢进的诊断，特别是同时存在相应的临床症状时。除非存在极为不常见的威胁生命的非甲状腺疾病（见下表），较低的血清T₄浓度可排除甲状腺机能亢进。血清T₄浓度位于参考值上半部，特别是临床症状暗示甲状腺机能亢进且在颈下部触摸到一个结节时，会产生一个诊断难点。猫患轻度或潜在甲状腺机能亢进，以及患有甲状腺机能亢进并有明显的非甲状腺疾病（例如，肿瘤、全身性感染、器官系统衰竭）时，血清T₄可能“正常”。血清T₄浓度“正常”不能排除甲状腺机能亢进，特别是存在相应的临床症状且在颈部可摸到一个肿物时。如果血清T₄结果不能确定，可在1~2周内测定血清T₄和用MED法测定fT₄并排除非甲状腺疾病。如果仍然无法建立诊断，应考虑在4~8周内复检血清T₄和fT₄，进行放射核素甲状腺扫描或进行T₃抑制试验。如果条件许可，对血清T₄和fT₄无诊断意义的猫可优先选择放射核素甲状腺扫描，其优于T₃抑制试验。仅在无法使用放射核素甲状腺扫描且血清T₄和fT₄持续无诊断意义时，才考虑进行T₃抑制试验。甲状腺结节可能无功能，而临床症状可能是由其它疾病引起的，知道这点十分重要。

表 疑似甲状腺机能亢进猫基础血清甲状腺素（T₄）浓度的解释

＊假设不存在严重的全身性疾病。
　　血清游离T₄浓度　评价甲状腺功能时，用MED法测定基础血清fT₄浓度比测定血清总T₄浓度更可靠，这部分是因为非甲状腺疾病对T₄的抑制作用比fT₄大，而且许多潜在甲状腺机能亢进和血清T₄浓度“正常”的猫，血清fT₄浓度是升高的。由于费用因素，MED法测定血清fT₄只用于T₄值处于边缘的疑似甲状腺机能亢进猫。有时并发的疾病会引起血清fT₄浓度升高――超出参考值范围。由于此项原因，血清fT₄必须结合同份血样测定的总T₄一起判读。血清fT₄浓度升高而总T₄升高或处于参考值上半部时，支持甲状腺机能亢进的诊断。血清fT₄升高而血清T₄浓度下降或处于参考值下半部时，支持甲状腺机能正常病态综合征的诊断，而不是甲状腺机能亢进。

T₃抑制试验　T₃抑制试验是评价垂体TSH分泌对碘甲腺原氨酸钠（合成T₃）抑制作用的反应。T₃用于正常猫时会抑制垂体TSH分泌，引起继发性血清T₄浓度下降。由于外源性T₃不会转化为T₄，因此血清T₄浓度是评价甲状腺功能的有效指标。甲状腺机能亢进猫会自发性分泌甲状腺素，而不依赖于垂体的控制。由于垂体功能已经被长期抑制，因此T₃用于甲状腺机能亢进猫时，血清T₄浓度可能只有轻度反应或无反应，T₃不会再有进一步的抑制作用。T₃抑制试验可把垂体-甲状腺轴正常猫与自发性分泌甲状腺素和可能患有甲状腺机能亢进猫鉴别出来。该试验的缺点是时间长（需要3天）、主人须给猫喂七次药以及如何让猫吞下药片的问题。

为了执行本试验，应先采血测定基础血清T₄和T₃浓度，然后从第二天早上开始主人给猫喂25mg碘甲腺原氨酸钠，每天3次，连用2天。第三天早上时，喂第7次碘甲腺原氨酸钠25mg，2~4小时后到医院采第二次血测定血清T₄和T₃浓度。

正常猫用药后的T₄浓度持续低于1.5 μg/dl，而甲状腺机能亢进猫用药后的T₄浓度高于2.0 μg/dl。检测值介于1.5~2.0之间时无决定意义。虽然正常猫基础血清T₄浓度会下降50%以上，而甲状腺机能亢进猫不会，但血清T₄浓度下降百分率不如绝对值可靠。血清T₃浓度用于确定主人是否如实地给猫喂药。无论甲状腺功能如何，用药后血清T₃浓度应比用药前升高。如果一只猫的血清T₄浓度不下降，且血清T₃浓度无升高，应考虑动物主人是否如实喂药，测定值是否可信。

TRH刺激试验　垂体-甲状腺轴正常时，静脉注射TRH可刺激垂体分泌TSH，继发引起猫血清T₄浓度升高。而对于甲状腺机能亢进猫，垂体TSH分泌功能被长期抑制，注射TRH不会引起TSH分泌增加。因此，甲状腺机能亢进猫使用TRH只会引起血清T₄浓度轻度升高或不升高。猫进行TRH刺激试验时，应在注射TRH（0.1mg/kg）前和注射后4小时采集血样测定血清T₄浓度。TRH刺激试验的缺点是费用高且可能继发一些副作用，包括流涎、呕吐、呼吸困难和排便。这些副作用通常在注射TRH后即可出现，持续时间长达4小时。TRH刺激试验已不再推荐用于诊断猫甲状腺机能亢进。

甲状腺放射性核素扫描　甲状腺扫描作为一种诊断方法，用于诊断患有相应临床症状而血清T₄无诊断价值猫；用于出现甲状腺机能亢进相应临床症状且血清T₄浓度升高，但颈部未触诊到甲状腺结节猫异位性甲状腺组织的定位；有助于制定出最好的治疗计划，尤其是在预测甲状腺切除的成功率和低血钙出现的可能性后。放射性锝99用于常规显现猫的甲状腺。其物理半衰期短（6小时），易浓缩在功能性甲状腺腺泡细胞内，同时反映了腺体的浓集机制。由于抗甲状腺药物不会影响甲状腺泵的浓集机制，即使甲状腺素合成被抗甲状腺药物完全抑制后，锝仍然会富集在甲状腺内。唾液腺和胃粘膜也会富集锝，并通过肾脏排泄。

    扫描甲状腺提供了一个所有功能性甲状腺组织的图片，并定位和区分功能性甲状腺组织和非功能性甲状腺组织区域。唾液腺和甲状腺吸收比例为1∶1，是判断甲状腺功能的标准。多数甲状腺机能亢进猫的甲状腺扫描都是明显异常的，通常很容易判读。