A physician who depends on the laboratory to make his diagnosis is probably inexperienced; one who says that he does not need a laboratory is uninformed. In either instance the patient is in danger.

                                                  J. A. Halsted

 

犬猫血液生化检测酶活性概述Basic princiles in clinical enzymology

 

机体细胞含有多种酶类，通过检测血液中各种酶活性可判断机体相应器官是否出现了病变。但酶活性受多种因素的影响，如分泌部位、循环途径、降解过程等，只有清楚了这些影响因素，才能根据酶活性的变化了解体内各器官更多的信息。

一、酶的位置

酶通常位于细胞内，一些具有器官特异性，一些可存在于多个器官。存在于多个器官具有不同的分子形式而功能相同的酶称为同工酶。血液中的酶无生理功能。通常酶存在于以下四个部位：1）细胞浆：如丙氨酸氨基转移酶（ALT）；2）线粒体：如谷氨酸脱氢酶（GLD）；3）细胞浆和线粒体：如天门冬氨酸氨基转移酶（AST₁、AST₂）；4）细胞膜：如碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）。

二、酶的释放

酶在细胞内的位置可影响其释放。存在于细胞浆内的酶是可溶性的，较容易释放，对于细胞完整性的改变以及细胞或器官疾病的诊断较为敏感。而存在于细胞器内的酶，只有在细胞严重损伤时才会释放，相对来说对疾病的诊断敏感性较差。

通常，各种因素引起细胞结构损伤，使得细胞膜形成泡状突起。受损的细胞可发生三种变化：1）泡状突起释放入血液或淋巴，然后溶解引起血清酶活性升高（可逆性损伤）；2）泡状突起处破裂，细胞浆酶释放入血液（不可逆损伤）；3）细胞自身损伤，无泡状突起释放或破裂^[1]。

三、酶在体内的循环及其降解

不同的组织细胞酶释放后去向及对血清酶活性的影响不同，归纳起来主要有以下四种情况：1）血细胞和肝细胞损伤引起血清酶活性快速升高；2）肌纤维内酶释放后经淋巴进入血液，血中酶活性升高的速率较慢；3）小肠黏膜或肾上皮细胞释放的酶可能不进入血液，由肠道或尿液排出；4）神经元释放的酶不通过血脑屏障，不会引起血清酶活性升高。

不同的酶其循环过程也可能不同。多数酶由细胞释放后进入组织间液，然后进入淋巴循环，最终出现在血液中。疾病时其动力学更复杂。例如，胰腺炎时，淀粉酶由胰腺分泌后进入腹腔液，经横膈淋巴循环吸收进入血液。

循环中多数酶被巨噬细胞或实质细胞降解，一些经尿液或粪便排出。

四、循环中酶活性的决定因素

机体循环中酶的活性主要取决于以下几方面的因素：1）组织中酶先天活性或器官合成能力；2）细胞内位置：酶存在于细胞浆还是黏附到细胞器；3）器官出现疾病或受诱导后酶释放入循环的速率和数量；4）降解或排泌的速率：如淀粉酶和脂肪酶部分经肾脏降解，肾血流下降可导致其血清活性升高。其它酶失活过程包括：与血液抗蛋白酶结合被巨噬细胞或肝细胞摄取，或与蛋白水解酶结合被巨噬细胞摄取而降解。如果这些过程被抑制，则酶失活速率减慢。

五、酶活性下降

多数血清酶活性降低无诊断意义。一般引起血清酶活性下降的因素有：血样处理出现问题（酶降解）、出现抑制剂（如抗凝血剂）等。

六、影响酶活性的因素

酶的活性不仅受自身因素的影响，血液的采集、药物、检测温度等对酶的活性也可产生一定的影响。归纳起来主要有以下几方面：1）年龄：不同年龄的动物酶活性参考值有一定的差异；2）血样采集与储存：是否禁食、采血时兴奋、恐惧、溶血、血清分离时间、血清保存时间与温度等；3）其它物质对检测的影响：血脂过高、药物、检测温度等。

七、血清酶活性的判读

血清酶活性的判读需要结合多方面的信息，如动物病史、使用的药物、临床症状等，除了这些基本信息外，主要有以下几方面因素也需要考虑。

1)检测方法：不同的实验室检测方法可能不同，相互间对比不能仅根据绝对值，要使用参考值上限（URL）倍数法。如ALT活性＝500U/L，参考值范围：10～50U/L，则该动物ALT活性＝10×URL。不同的检测方法酶活性绝对值可能不同，但超出参考值的倍数几乎是一样的。最好的比较法是与自身正常时酶活性值相对比。

2)酶活性增长幅度：酶活性增长幅度对疾病的诊断也具有鉴别意义。如ALT活性达15×URL时可能是由于肝细胞损伤，而不是肌肉损伤；成年犬ALP活性达10×URL时不太可能是骨骼疾病所致，而要考虑肝病或皮质类固醇因素。

3)血清酶半衰期：如肌酸激酶（CK）半衰期较AST短，在分析单次肌损伤时，CK活性较AST更快恢复至正常。

血液生化检测可提供肝脏、肾脏、肾上腺等功能的直接评价。除了帮助诊断外，生化检测也有助于我们判断预后。当然，酶活性的判读还需要结合其它方面的信息，对动物整体状况要有全面的了解，如此才能作出准确的判断。