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在饲养层上培养胚胎干细胞难道不会发生接触抑制吗?

(2013-05-03 09:00:10)
标签:

教育

在回答该问题前先明确两个问题:一是饲养层细胞用来做什么,在进行胚胎干细胞(ES细胞)培养时饲养层细胞是否继续生长;二是ES细胞生长特性,它是否会发生接触抑制。

在培养ES细胞时为了ES细胞建系和能较好地生长,常在培养皿的底部加一些其他细胞,让这些细胞能形成单层细胞,这就是所谓的饲养层细胞。用于ES细胞建系和培养的饲养层细胞大多是胎儿成纤维细胞,但这些细胞需经过特殊处理。一般用丝裂霉素C或者g射线照射,这些处理的目的是使细胞可以维持存活但不再进行细胞分裂,细胞接到培养皿中后只能形成单层细胞不再继续生长。存活的饲养层细胞就可分泌生长因子和白血病抑制因子(LIF),供ES细胞生长用,并抑制ES细胞的分化。

ES细胞因其细胞内具有端粒酶可进行无限分裂,在特性上的确类似于癌细胞。将ES细胞注射到裸鼠皮下可诱导出肿瘤,说明ES细胞的确具有癌细胞的特性。由于ES细胞具有癌细胞的特性,在体外生长时不存在所谓的接触抑制。另外,ES细胞生长与普通细胞生长方式不同,普通细胞为贴壁生长,在培养皿底部生长为单层细胞;而ES细胞为立体生长,正常情况下生长为集落或克隆样结构。如小鼠ES细胞为鸟巢状结构而非扁平单层结构。

在明确了上述两个问题后,我想有关饲养层细胞和ES细胞接触后是否会出现接触抑制的问题自然就明白了。ES细胞的集落生长在饲养层细胞上,不存在接触抑制,饲养层细胞可促进ES细胞接触到培养皿上并能促进其生长。


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