【摘要】  目的 探讨多肿瘤标志物蛋白质芯片检测系统（C12）在老年肺癌诊断中的临床应用价值。方法采用C12检测135例老年肺癌患者（肺癌组）、150例肺良性病变患者（肺良性病变组）、154例无肺部病变及其他肿瘤患者（对照组）12种肿瘤标志物水平。结果 肺癌组C12检测阳性率明显高于肺良性病变组（P＜0.001）和对照组（P＜0.001）。肺癌组糖类抗原199（CA199）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原242（CA242）、血清铁蛋白（ferritin）、糖类抗原125（CA125）、糖类抗原153（CA153）阳性率明显高于肺良性病变组（P均＜0.001）和对照组（P均＜0.001）。肺癌组CA199、CEA、CA242、βHCG、CA125、CA153水平较肺良性病变组明显升高（P＜0.01、0.001、0.001、0.05、0.001、0.01）和对照组（P＜0.01、0.001、0.001、0.05、0.001、0.01）。在单项肿瘤标志物检测中，以CEA敏感性最高，为46.90%。CA199、CEA、CA242、CA125、CA153联合检测、C12检测敏感性较单项检测明显提高，分别为65.93%和66.67%。5项联合检测的特异性(94.74%vs 81.32%)、有效性（85.88%vs 81.32%）、5项联合检测阳性预测值（84.76%vs 70.87%）较C12检测均提高。结论 肺癌组CA199、CEA、CA242、βHCG、CA125、 CA153水平较肺良性病变组和对照组明显升高。C12检测对诊断老年肺癌有较高的临床应用价值，CA199、CEA、CA242、CA125、 CA153联合检测可能是诊断老年肺癌更优化的组合。

【关键词】  肿瘤标志物；老年人；肺肿瘤

多肿瘤标志物蛋白质芯片是一种高通量、高灵敏度、高特异性且微型化的蛋白质分析技术〔1〕，该项技术对多种肿瘤的早期诊断有一定的作用。老年肺癌患者多肿瘤标志物的变化情况报道少见，且老年人反应较差，症状少，发现时多为较晚期。因此，提高老年肺癌早期诊断至关重要。本研究利用蛋白芯片技术对老年肺癌患者、肺良性病变患者、无肺部病变和其他肿瘤患者同时检测12种肿瘤标志物的水平，以探讨其在老年肺癌诊断中的临床应用价值。

　　1  对象与方法

　　1.1  对象  所有受试者均为住院患者或健康体检者，年龄≥60岁。肺癌组135例，男107例，女28例，年龄60～87岁，平均（72±7）岁，均经细胞学或组织学确诊。其中肺鳞癌58例，肺腺癌60例，肺腺鳞癌4例，肺小细胞癌13例。肺良性病变组150例，男120例，女30例，年龄60～87岁，平均（74±7）岁。肺部良性病变包括慢性支气管炎、肺炎、支气管哮喘、支气管扩张、慢性阻塞性肺气肿、肺结核。对照组154例，男122例，女32例，年龄60～90岁，平均（73±9）岁，为排除任何肺部疾病和其他肿瘤的同期住院患者或健康体检者。

　　1.2  方法  所有患者均清晨空腹采静脉血2 ml，分离血清，-20℃保存待测，采用C12型肿瘤诊断用蛋白芯片试剂盒（简称C12，上海数康生物科技有限公司生产），严格按说明书操作，并采用其提供的专用芯片阅读仪读取光信号，对肿瘤标志物进行定量检测。12项指标包括：糖类抗原199(CA199)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原242(CA242)、血清铁蛋白(ferritin)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原153(CA153)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、βHCG、甲胎蛋白(AFP)、游离型前列腺特异性抗原(FPSA)、前列腺特异性抗原(PSA)、生长激系(HGH)。肿瘤标志物中除ferritin外，任何一项标志物结果高于正常参考值范围即定义为阳性病例，各项肿瘤标志物结果高于正常参考值范围即定义为该项肿瘤标志物阳性病例。

　　1.3  统计学方法  采用SPSS13.0统计软件包进行统计。所有计数资料以率表示，采用χ2检验。计量资料用x±s表示，数据采用方差分析。

　　2  结果

　　2.1  总阳性率比较  见表1。肺癌组阳性病例（不包括仅ferritin结果高于正常病例）90例，阳性率66.67%；肺良性病变组阳性病例21例，阳性率14.00%；对照组阳性病例16例，阳性率10.39%。肺癌组阳性率明显高于良性病变组（χ2=82.88，P＜0.001）和对照组（χ2=98.10，P＜0.001）。

　　2.2  单项肿瘤标志物阳性率比较  见表1。肺癌组CA199、CEA、CA242、ferritin、CA125、CA153阳性率明显高于肺良性病变组（χ2分别为145.17、73.44、41.47、8.44、68.21、18.83，P均＜0.001）和对照组（χ2分别为166.55、91.90、36.45、18.41、79.94、13.72，P均＜0.001）；而肺癌组NSE、βHCG、AFP、FPSA、PSA、HGH阳性率和肺良性病变组、对照组相比无显著性差异。肺癌组CEA的阳性率最高，为46.90%；其次为CA125，阳性率为44.25%。肺良性病变组和对照组均以ferritin阳性率最高，分别为23.21%和16.88%。

　　2.3  肿瘤标志物血清水平的比较  见表2。肺癌组CA199、CEA、CA242、βHCG、CA125、CA153水平较肺良性病变组（P＜0.01、0.001、0.001、0.05、0.001、0.01）和对照组（P＜0.01、0.001、0.001、0.05、0.001、0.01）明显升高；肺癌组NSE、ferritin水平较对照组升高（均P＜0.05），和肺良性病变组比较无显著性差异，且肺部良性病变组ferritin水平也较对照组明显升高（P＜0.05）；AFP、FPSA、PSA、HGH三组间差异无统计学意义。

　　2.4  单项肿瘤标志物、联合检测及C12检测对肺癌诊断的敏感性、特异性、有效性、阳性预测值和阴性预测值比较  见表3。在单个肿瘤标志物检测中，以CEA敏感性最高，为46.90%。6项（CA199、CEA、CA242、ferritin、CA125、CA153）联合检测虽较5项（CA199、CEA、CA242、CA125、 CA153）联合检测敏剐性高（79.30%vs 65.93%），但特异性（76.00%vs 94.74%）、有效性(76.08%vs 85.88%)和阳性预测值（58.52%vs 84.76%）均明显降低。5项联合检测、C12敏感性较单项检测明显提高，分别为65.93%和66.67%。5项联合检测虽较C12敏感性（65.93%vs 66.67%）稍低，但特异性(94.74%vs 81.32%)、有效性（85.88% vs 81.32%）、阳性预测值（84.76%vs 70.87%）均提高。

　　表1  三组总阳性率、单项肿瘤标志物阳性率（略）

　　与肺癌组比较：1）P＜0.001

　　表2  三组12种肿瘤标志物的血清水平比较（略）

　　与肺癌组比较：1）P＜0.05，2）P＜0.01，3）P＜0.05；与对照组比较：4）P＜0.05

　　表3  单个肿瘤标志物、联合检测及C12检测的敏感性、特异性、有效性、阳性预测值和阴性预测值（略）

　　3  讨论
　　肿瘤标志物的检测对肺癌的早期发现和诊断价值已受到广泛的关注，单一标志物检测存在着特异性不强和阳性率较低的缺陷。本文采用C12检测系统对老年肺癌患者进行检测，结果发现诊断阳性率为66.67%，而单一标志物阳性率最高为CEA，阳性率为46.90%。因此多肿瘤标志物的联合检测明显提高了诊断的敏感性，弥补了单一检测的不足，也说明多肿瘤标志物的联合检测对老年肺癌患者诊断具有较高的临床应用价值。
　　本研究中肺癌组CA199、CEA、CA242、CA125、CA153水平较肺良性病变组和对照组明显升高，CA199、CEA、CA242、ferritin、CA125、CA153阳性率较肺良性病变组和对照组也明显升高，与文献基本相符〔2，3〕。CA199在部分肺癌患者中有不同程度的升高，但敏感性不高，可作为诊断肺癌的一个辅助指标。CEA是从结肠癌和胎儿肠中提取的抗原，是目前应用最广泛的肿瘤标志物之一，在多数癌症患者中都升高，不能作为诊断肺癌的特异性指标，但敏感性较高，在30%～80%肺癌患者血清中其浓度升高,升高程度与癌细胞的多少直接相关〔4〕。本研究单项检测时的敏感性为46.90%，与文献基本相符〔5〕。CA242是一种与黏蛋白有关的标志物,也是一种唾液酸化的糖脂类抗原,对肺癌有一定的阳性检出率，敏感性较低。ferritin 是一个非特异性的指标，在人体组织中广泛存在，在健康人群中分布范围很大，个体差异明显，且多种恶性肿瘤以及急性感染、活动性结核、非特异性炎症等情况下均可增加，单独出现阳性时无特殊意义，假阳性率高，文献报道约20%〔6〕，本研究中阳性率为35.40%，而特异性低（20.1%），假阳性率极高（79.90%），且肺良性病变组水平较对照组也明显升高，说明在老年人ferritin诊断肺癌的特异性更差，可能不适合作为肺癌的一项辅助诊断措施。CA125也是一种糖类抗原，临床上主要作为卵巢癌的标志物，近年发现在肺癌中明显升高，Diez〔7〕等报道血清CA 125诊断肺癌的敏感性为44%,本研究中CA125的敏感性为44.25%，仅次于CEA。CA153是由一种由腺体分泌的多形上皮蛋白，存在于多种腺癌内（乳腺癌、肺癌、卵巢癌），据报道CA153对肺癌的早期诊断、疗效检测和预后判断有较高的临床应用价值〔8〕。本研究CA153 在老年肺癌中阳性率较低，仅11.50%。
　　6项联合检测虽较剔除ferritin后的5项联合检测敏感性高，但特异性、有效性和阳性预测值均明显降低，进一步说明在老年肺癌诊断中，ferritin为一非特异性指标。5项联合检测、C12敏感性较单项检测明显提高，但联合检测在提高诊断的敏感性的同时,特异性也相应下降,所以诊断时需排除假阳性。5项联合检测虽较12项联合检测敏感性稍低，但特异性、有效性、阳性预测值均提高，提示在老年肺癌患者5项联合检测可能是更优化的组合，既可减少患者经济负担，又可提高诊断的特异性、有效性和阳性预测值，有更好的临床应用价值。
　　多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统是医学肿瘤检测的发展方向，该系统实现了在同一体系下多种肿瘤标志物的联合检测,为临床肿瘤的诊断提供了一种全新的检测方法和诊断手段,具有简便快速价格较低廉的优势。但该检测系统还不够成熟，有待从肿瘤的特异性和经济学的角度进一步完善，以适合于不同类型肿瘤检测的需要。【提供服务：生物芯片整体解决方案、兽药残留芯片检测系统；生物芯片扫描仪等仪器；耳聋基因芯片、乙肝病毒耐药检测芯片、抗核抗体检测蛋白质芯片、结核分枝杆菌耐药检测芯片、G+细菌鉴定与耐药检测基因芯片等；食源性致病微生物检测试剂盒、兽药残留芯片检测试剂盒等；HLA基因分型检测方案、血小板基因分型；人类全基因组寡核苷酸微阵列芯片服务、家蚕全基因组寡核苷酸微阵列芯片服务、人肿瘤相关基因寡核苷酸微阵列芯片服务、miRNA微阵列芯片服务、DNA甲基化谱检测寡核苷酸芯片服务等；合作共建研究中心服务、生物芯片实验室建设服务、科研课题研究服务；糖尿病超强化治疗技术应用项目合作。请联系索取详细产品和服务介绍资料：医学与生命科学服务中心暨虫洞（北京）卫生科技有限公司，戴天岩  主任、总经理，手机：13051069337，E-mail:davad311@126.com，msn:davad311@hotmail.com,qq:104974415，虫洞医学与生命科学网http://blog.sina.com.cn/cnyr】

【参考文献】
  1 Eggeling F,Davies H,Lomas L,et al.Tissuespecific microdissection coupled with protein chip array technologies：applications in cancer research〔J〕.Biotechniques,2000；29：106670.
　　2 潘秀军，王连升，沈 霞.多肿瘤标志物蛋白芯片技术在肺癌诊断中的应用〔J〕.上海第二医科大学学报，2005;25：83941.
　　3 董淑文，丁 彦，邱小建，等.多肿瘤标志物蛋白芯片检测方法对肺癌的诊断研究〔J〕.中国医师进修杂志，2006；29：202.
　　4 Foa P，Fornier M，Miceli R，et al.Tumour markers CEA，NSE，SCC，TPA and CYFRA 21.1 in resectable nonsmall cell lung cancer〔J〕. Anticancer Res，1999；19：36138.
　　5 Body JJ，Sculier JP，Raymakers N，et al.Evaluation of squamous cell carcinoma antigen as a new marker for lung cancer〔J〕.Cancer，1990；65：15526.
　　6 左 强，张军一，郑 航，等.多种肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肺癌的诊断价值〔J〕.中国肺癌杂志，2004；7：1547.
　　7 Diez M，Torres A，Maestro ML，et al.Prediction of survival and recurrence by serum and cytosolic levels of CEA，CA125 and SCC antigens in resectable nonsmallcell lung cancer〔J〕.Br J Cancer，1996；73：124854.
　　8 沈方臻，梁 军.血清肿瘤标志物在肺癌诊断中的价值〔J〕.齐鲁医学杂志,2003；18:11820.