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学生的问题：教材上说酶的固定方法主要有四类，即吸附法、共价偶联法、 交联法和包埋法等，那么，共价偶联法和交联法有什么区别？

固定化酶技术即将酶固定在一定空间 内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。

固定化酶技术的优点：（1）使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；（2）固定在载体上的酶可以被反复利用。

1．共价偶联法

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是将酶与聚合物载体以共价键结合的固定化方法。酶中的氨基、羧基、巯基、羟基、咪唑基、吲哚基、苯环等常与载体共价结合 但必须注意，参加共价结合的氨基酸残基应当是酶催化活性非必需基团，如若共价结合包括了酶活性中心有关的基团，会导致酶的活力损失。

吸附法和共价偶联法又可统称为载体结合法。

2.交联法－戊二醛

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是使用双功能或多功能试剂使酶分子之间相互交联呈网状结构的固定化方法。 其中使用最广泛的是戊二醛。戊二醛和酶蛋白中的游离氨基发生 反应，从而使酶分子之间相互交联形成固定化酶。

但是，交联法中酶的活性中心构造可能受到影响，而使酶失活明显。

3.吸附法：

①物理吸附法

将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，对蛋白质有高度的吸附能力、又不引起酶变性且能保持一定酶活性。如：活性碳、多孔玻璃、石英砂、有机硅等酶固体吸附剂。

②离子交换法

利用蛋白质的两性性质，使其带有电荷的基团与离子交换剂 形成离子键，而被交换结合在交换剂上酶和载体结合不牢固，在使用过程中容易脱落，所以使用 受到限制。

4.包埋法

包括凝胶包埋法和微胶囊包埋法，将酶包裹在多孔的载体中，包埋成格子型或包埋成微胶囊型。

链接：

细胞固定的方法—微胶囊法