血细胞计数板的构造和使用_蒸水滔滔

血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面，刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为0.1mm³ 。

计数室通常有两种规格。一种是大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成，见图。

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2 血细胞计数板的使用（以计数酵母菌为例）

2.1 视酵母菌悬液的浓度，加无菌水适当稀释，以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜，一般稀释10倍即可。

2.2 将血细胞计数板用擦镜纸擦净，在中央的计数室上加盖专用的盖玻片。

2.3 将稀释后的酵母菌悬液，用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘，使菌液缓缓渗入，多余的菌液用吸水纸吸取，稍待片刻，使酵母菌全部沉降到血球计数室内。

2.4 计数时，如果使用16格×25格规格的计数室，要按对角线位，取左上，右上，左下，右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数。如果规格为25格×16格的计数板，除了取其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。

当遇到位于大格线上的酵母菌，一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞)。

对每个样品计数三次，取其平均值，按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。

计算公式

(1)16格×25格的血细胞计数板计算公式：

酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×10⁴×稀释倍数