摘要：目的 观察不同比率的阳离子脂质体介导的β1受体反义基因对H9C2心肌细胞β1受体mRNA及受体蛋白表达的影响，寻求最佳转染比率，并探讨基因治疗机制。方法 H9C-2心肌细胞，用去甲肾上腺素（norepinephrine，NE）刺激24 h后转染β1受体反义寡核苷酸(β1 antisense oligonucleotides，β1-AS-ODN)，脂质体与β1-AS-ODN的混合摩尔比为2.0、2.5和3.0，分别转染18 h、24 h和36 h；在倒置荧光显微镜下观察培养的心肌细胞的形态；用免疫印迹技术测定心肌细胞β1受体蛋白的时间表达曲线。实验分为4组：NE 加β1受体反向寡核苷酸(β1 inverse oligonucleotides，β1-IN-ODN组、NE 加β1-AS-ODN组、NE加心肌细胞组和心肌细胞组，用半定量逆转录多聚酶链反应检测心肌细胞β1受体mRNA的表达，免疫印迹技术测定心肌细胞β1受体蛋白的表达。 结果  β1-AS-ODN分布在心肌细胞的胞浆及细胞核中，转染24 h效率达70%，此后平缓降低；NE 组的心肌细胞β1受体蛋白显著升高；与NE 组相比，脂质体与β1-AS-ODN的混合摩尔比2.0、 2.5,和3.0的心肌细胞β1受体蛋白显著降低(P<0.05)。与心肌细胞组比较，NE 组和β1-IN-ODN对照组的心肌细胞β1受体mRNA和受体蛋白显著升高(P<0.01)；与NE组相比，反义治疗组的心肌细胞β1受体 mRNA和受体蛋白显著降低(P<0.01)。结论  阳离子脂质体与β1-AS-ODN比率为2.5转染24 h效果最好，其机制可能是通过激活核糖核酸酶 H降解靶mRNA，在转录和翻译水平抑制目的基因表达。

Effects of ß1 adrenoceptor antisense on ß1 adrenoceptor mRNA and protein in H9C2 myocardial cells 

 

 

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