伍文定（1470－1530），字時泰，明朝湖廣承宣布政使司荊州府松滋縣（今湖北省松滋市西北老城）人，同進士出身、軍事將領。官至明朝兵部尚書，曾經參與平定宸濠之亂。

弘治十二年，伍文定登進士，强於弓馬膂力，喜歡議論。最初授常州推官，善於決斷案件，期間勸魏國公徐與退田于民，后因劉瑾接受徐與賄賂，巡撫艾樸等十四人悉數被逮捕，當時伍文定已經升至成都同知，也因此下詔獄，被貶斥為民。之後劉瑾事敗后，伍文定重新起用，并平定江西姚源王浩八等民亂，此後升爲河南府知府，擒拿張勇、李文簡叛亂。因政績，調任吉安府知府，評定永豐及大茅山叛亂，此後輔佐巡撫王守仁平定桶岡、橫水。

宸濠之亂時，朱宸濠起兵，吉安府官民爭相逃亡，伍文定斬殺一個逃亡者后，眾人紛紛安定，并迎接王守仁入城抗敵。此後知府邢珣、徐璉、戴德孺等紛紛前來共同討伐，伍文定擔任大帥。在戰場上，伍文定身中矢石，火燒須鬚而不動。平定叛亂后，因功最大，升任江西按察使。太監張忠、許泰抵達南昌，意圖冒功，但是王守仁已經俘虜朱宸濠抵達浙江。至此張忠大恨，伍文定反被捆綁。之後，伍文定仍然升爲廣東右布政使，未赴任時，世宗已經嗣位。伍文定於是上疏稱監張忠、許泰罪過，并請發放朱宸濠貲財，奉還江西，并釋放被張忠、許泰冤枉之人，明世宗對此表示嘉獎并批准。

此後論功，升任右副都御史，提督操江。嘉靖三年，討平海賊董效，后因病請辭。嘉靖六年，召為兵部右侍郎，同年冬升任右都御史，掌管都察院事。次年，升任兵部尚書，提督雲南、四川、貴州、湖廣軍，討伐雲南土酋安銓叛亂，并后因尚書方獻夫、李承勛詆毀而令致仕。嘉靖九年去世。天啟初年，追諡忠襄。