PCR技术中的引物的本质和作用是什么

井中之蛙/编辑

引物是一小段单链DNA或RNA，引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点，在细胞外的条件下，只有通过引物，DNA才可以开始进行复制。

引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA模板链互补。

例如 (2011·北京理综，31)T－DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的T－DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为T1代)。

(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除________，因为后者产生的________会抑制侧芽的生长。

(2)为筛选出已转化的个体，需将T1代播种在含________的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为T2代)。

(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T2代播种在含________的培养基上，获得所需个体。

(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与________植株进行杂交，再自交________代后统计性状分离比。

(5)若上述T－DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性________。

                                           http://s2/mw690/4cc04aa3ge1b571770391&690 

[解析]　(1)为使侧枝发育形成更多的花蕾，要破坏顶端优势，因此，需去除顶芽，因为顶芽产生的生长素在侧芽积累，会抑制侧芽生长。(2)要筛选出抗除草剂的个体，应将T1代播种在含一定浓度除草剂的培养基上生长。(3)要筛选出抗盐性状的个体，应将T2代播种在含一定浓度盐的培养基上生长。(4)要确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将突变体与野生型植株进行杂交，得到F1，再让F1自交，统计F2的性状分离比。 (5)抗盐突变体的抗盐性强，野生型基因的存在会降低植物的抗盐性。(6)PCR技术可扩增基因，先应提取突变体DNA作目的基因，然后用同一种限制酶处理目的基因和运载体，再用DNA连接酶连接成重组DNA，从图中可看出A、D为模板链，B、C为引物。

[答案]　 (1)顶芽　生长素

(2)(一定浓度的)除草剂

(3)(一定浓度的)盐

(4)野生型　1

(5)降低

(6)突变体　DNA连接酶　B、C