MTT法

试题研究：实验试题中出现MTT法测定细胞的代谢情况、细胞活力和细胞增殖能力。什么是MTT法？原理怎么样？什么方法测定？

一、MTT是什么

MTT是一种粉末状化学试剂，全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。

二、MTT法用来做什么

简单地说：是一种检测细胞存活和生长的方法。

MTT主要有两个用途

1．药物（也包括其他处理方式如放射线照射）对体外培养的细胞毒性的测定；

2．细胞增殖及细胞活性测定。

三、为何MTT可以用来做上述工作

检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。

二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

根据测得的吸光度值（OD值），来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强（如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小）。

四、注意事项

MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。所以测定细胞细胞数目还需要用其他方法。

因此，如果要测定增殖力（活细胞占总细胞数的百分率），还需要如血细胞计数板等方法测出总细胞数。