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对TaqDNA聚合酶的了解

(2020-03-22 23:40:52)
标签:

教育

taqdna聚合酶

分类: 疑难问题的解决

对TaqDNA聚合酶的了解

教材研究:教材中出现了TaqDNA聚合酶,摘录有关的内容以便教学之用。现在在应用中的酶往往是经过改造过的。

1、来源和特性

TaqDNA聚合酶是一种耐高温的依赖于DNA模板的DNA聚合酶,来源于极度嗜热的嗜热水生菌Thermus aquaticus YT1,故称作Taq DNA聚合酶,一般应用于PCR反应。

TaqDNA聚合酶是一种Mg2+依赖酶,反应体系中必须有Mg2+存在,然而保持适当的Mg2+浓度十分重要,因为Mg2+浓度过高或过低均会影响引物与模板的结合、模板与PCR产物的解链温度、引物二聚体的形成以及酶的活性与精确性。

2、两种作用

具有5-3DNA聚合酶活性和5-3’外切核酸酶活性,无3-5’外切酶活性。

3、应用

Taq DNA聚合酶在PCR中的应用,普通Taq DNA聚合酶虽然得到广泛使用,但是仍然存在不足。各个实验室针对Taq DNA聚合酶的不足进行了不同形式的改造,以降低或消除酶的5’→3’核酸外切酶活性,提高酶的续进性、忠实性、特异性和耐热性等。

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