核移植胚激活的方法肤浅认识

标签:
教育胚激活 |
分类: 疑难问题的解决 |
教材研究:选修3第52页胚胎干细胞核移植技术中,首先要经过胚激活,那么,胚的激活方法是怎么样的?看了一些资料认为,其实是卵母细胞的激活,确实有一定的方法,现学习后摘录如下。
核移植后的重构胚,只有卵母细胞质被激活后才能启动发育,低的核移植胚发育率可能与卵母细胞质未充分激活有关。
一、激活常用方法
目前,用于卵母细胞激活的方法主要分为单一激活和联合激活。常用的单一激活主要有电激活、钙离子载体A23187、离子霉素(Ionomycin)及乙醇等;联合激活主要是单纯的物理刺激或化学刺激以后再用蛋白质合成抑制剂或蛋白质磷酸化抑制剂或细胞松弛素B联合处理的一种激活方式。现在越来越多的研究证明联合激活比单一的电激活或化学激活效果好。
二、方法之一介绍(某发明)
原文链接:http://www.xjishu.com/zhuanli/02/201010518112.html
本发明的目的在于提供一种显微受精胚胎体外发育激活方法,其主要包含步骤:(1)离心精液;(2)在离心后的精液中加入D-PBS液,放在38. 5°C,5% CO2、100%湿度下的培养箱中缓慢上游10分钟;(3)将步骤(2)处理后的精液注入卵母细胞中;(4)用5umol/L离子霉素+2mmol/L6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)激活注射后的卵母细胞,得受精卵。所述的方法,步骤(1)所述离心的转速为2000r/Min。
所述的方法,步骤(4)具体可以为用5umol/L离子霉素激活处理注射后的卵母细胞5分钟后再用2mmol/L6- 二甲基氨基嘌呤激活处理3个小时,得受精卵。本发明提供的显微受精胚胎体外发育激活方法操作容易且激活率高。