龙胆紫

学生的问题：什么是碱性染料？醋酸洋红含有醋酸，醋酸是酸性物质，怎么会是碱性染料？

其实，这是个老问题，考试也没有这方面的要求，要回答这个问题，需要搞清楚染料染色的机理。首先要明确的是，生物学中的碱性染料还是酸性染料，不是根据pH来划分的。

作为染色剂必须要具备两个条件：一是要具有颜色；二是要和被染组织间有亲和力。染料的颜色和它与组织间的亲和力是由染料本身的分子结构决定的，产生颜色的发色基团和与组织间产生亲和力的助色基团共同决定了染色剂的染色性质。

一、用于染色体染色的碱性染料

1．龙胆紫

1～2％的龙胆紫溶液俗称紫药水，是人们所熟悉的外用药。它是一种碱性阳离子染料，因其阳离子能与细菌蛋白质的羧基结合，影响其代谢而产生抑菌作用。它能抑制革兰氏阳性菌，特别是葡萄球菌、白喉杆菌，对白色念珠菌也有较好的抗菌作用。它杀菌力强，对组织没有刺激性，也没有毒性和副作用。

2．醋酸洋红

醋酸洋红常被用作核、染色体的固定和染色剂。在“观察植物细胞有丝分裂”（即“观察根尖分生区组织细胞”）时，对染色体进行染色，需要用碱性染液，此时可以使用醋酸洋红或龙胆紫染液。

二、碱性染料如何界定

分子结构的某些基团吸收某种波长的光，而不吸收另外波长的光，从而使人觉得好像这一物质“发出颜色”似的，因此把这些基团称为“发色基团”。例如，苯的衍生物具有可见光区吸收带，可作为发色基团。此外，发色基团还有硝基(－NO₂)、偶氮基（一N=N一）、乙烯基等。

作为染料物质，除了有发色基团外还需要有一种使化合物发生电离作用的助色基团。由一OH一、SO₃H、一COOH等酸性基团和一NH₂、一NHCH₃、一N（CH₃）₂等碱性基团构成了助色基团。它们的存在使染料物质离子化，极性增强，促进染料与组织间发生作用，产生染色效果。

龙胆紫的结构式

助色基团中带正电荷的染色剂则称为碱性染色剂，反之则为酸性染色剂。

三、染色的机理

细胞核中的染色质内含有DNA，属于酸性物质，可以电离出H 而使自身带负电荷，因此它可以与碱性染料电离出的带正电荷的助色基团通过电荷间的引力作用牢固结合而被染料染上颜色。

碱性染料通常不溶于水及酒精。可以电离出无色的阴离子和有色的阳离子，比如龙胆紫、亚甲基蓝和美蓝等。碱性染料的阳离子是有色离子，有色离子可以与细胞中的带负电荷部分牢固地结合。

四、为什么要洗去盐酸便于碱性染料使染色体染色？

在“植物细胞有丝分裂的观察”实验中，如果用盐酸解离后不漂洗直接染色，因为盐酸是一种强酸，而DNA为一种弱酸，盐酸的存在能够抑制DNA的电离，从而使DNA不能与龙胆紫中带正电荷的助色基团结合，这样染色质就不能被染上颜色。