肝脏细胞中提取线粒体

试题中产生的问题：在高中生物学习中，学生对离心方法不够熟悉，所以在解答试题时难以理解。再说，学生对微观结构的大小没有概念，因些，有必要进行适当的知识拓展。

以前研究过离心方法链接：

 差速离心法和密度梯度离心法的区别

尽管这两种离心方法有区别，有时可以共同使用，要看实验目的和要求，差速离心用以分离细胞器，密度梯度离心用以纯化细胞器。例如，线粒体可以用差速离心法分离，必要时再用密度梯度离心法分离。

试题1（作业本上的试题，本人觉得此题的分层的获取是值得商榷，因为首先是差速离心技术分离，不会第一次就出现四层。）：把鼠的肝细胞磨碎后高速离心，细胞匀浆分成a、b、c、d四层，往c层加入葡萄糖，没有CO₂和ATP产生，再加入丙酮酸后，马上就有CO₂和ATP产生，则c层必定含有的细胞器是（　　）
     A．线粒体          B．核糖体           C．细胞溶胶        D．高尔基体

答案：A

分析：肝细胞是动物细胞，有CO₂生成说明进行需氧呼吸，需氧呼吸分三个阶段及场所是：第一阶段是葡萄糖分解为丙酮酸，场所是细胞溶胶；第二阶段是丙酮酸氧化分解为CO₂，场所是线粒体；第三阶段[H]与氧气发生氧化分解产生水，场所是线粒体，故A正确；核糖体是合成蛋白质的场所，故B错误；细胞溶胶是需氧呼吸第一阶段的场所，具体物质变化时葡萄糖分解为丙酮酸，故C错误；高尔基体与动物细胞分泌物的形成有关，对蛋白质有加工和转运的功能，与植物细胞壁的形成有关，故D错误；故选A。

试题2：在低温条件下，将叶片置于研钵中，加入某种溶液研磨后，将细胞碎片和细胞器用离心法进行分离，第一次分离成沉淀P1（含细胞核和细胞壁碎片）和上层液体S1；随后又将S1分离成沉淀P2（含叶绿体）和上层液体S2；第三次离心将S2分离成沉淀P3（含线粒体）和上层液体S3；最后一次将S3分离成沉淀P4（含核糖体）和上层液体S4。据图回答下列问题（填入相应的字母）。

 

（1）细胞的DNA主要存在于________部分。

（2）若要继续分离得到与光合作用有关的酶，应选取________部分。

（3）若要研究合成蛋白质的细胞器，应选取________部分。

（4）含有与有氧呼吸有关的酶的是________________________________。

答案：（1）P1　（2）P2　（3）P4　（4）S1、S2、P3

分析：如下图所示：（1）DNA主要存在于细胞核中，同时在细胞质的叶绿体和线粒体中也有分布，因此P1部分含量最多。（2）光合作用的场所是叶绿体，叶绿体的形状呈椭球形或球形，存在于P2中。（3）合成蛋白质的细胞器是核糖体，主要存在于P4部分。（4）能彻底分解葡萄糖的场所是线粒体，它是需氧呼吸的主要场所，存在于S1、S2、P3中。

试题3：将鼠的肝细胞磨碎，进行差速离心（即将细胞匀浆放在离心管中，先进行低速离心，使较大颗粒形成沉淀；再用高速离心沉淀上清液中的小颗粒物质，从而将细胞不同的结构逐级分开），结果如图所示．在S1-S4及P1-P4中，进行需氧呼吸的细胞器应分布在（　　）

A．S2            B．S3        C．P2         D．P4

答案：C

分析：S2除线粒体之外的细胞器，A错误；S3为除线粒体、其他有膜的细胞器外的细胞器，B错误；P2线粒体，C正确；P4为核糖体，D错误；故选：C。