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细胞体外培养贴壁生长的原因

(2016-03-02 15:07:26)
标签:

教育

贴壁生长

分类: 疑难问题的解决

细胞体外培养贴壁生长的原因

学习感悟:选修3教材上,细胞体外培养贴壁生长,为什么会贴壁生长,今天看了刘梅芳老师发表在2007年第9期《生物学通报》上的文章,学习了并摘录如下。

1.体内细胞也有黏附在一起的特性

在体内,大部分细胞不是孤立存在的(血液中的细胞除外)。一般一种细胞具有一种特定的功能,不同种细胞有机组合在一起就构成能够完成较为完整的一项功能的器官。细胞之间,细胞与细胞外基质之间结合在一起,这使得每一部分组织或者器官具有一定的外形及特定的功能。

血液在体内是起运输作用的,不停地流动,要通过只有几个微米的毛细血管,所以血液中的细胞是单个存在的,否则就会发生血管阻塞。但是一旦它们受到刺激,其表面与黏附有关的蛋白会被激活,然后与其他细胞或细胞外基质结合,这些都应该是属于细胞之间的结合。

例如,血小板接触到破损内皮下的胶原被激活而黏附在局部,从而发挥止血的功能;巨噬细胞可以将衰老的红细胞、血液中凋亡的中性粒细胞结合并将其吞噬。

另外,有些研究表明细胞必须与其他细胞发生联系才能够生存,如果没有其他细胞或者细胞外基质与之结合,此细胞就会发生凋亡,称为失巢凋亡。失巢凋亡是一种细胞程序性死亡,是由于细胞外基质和其他细胞脱离接触而诱发的。失巢凋亡作为一种特殊的程序化细胞死亡形式,在机体发育、组织自身平衡、疾病发生和肿瘤转移中起重要作用。

2.体外培养细胞贴壁与什么有关?

细胞在体外培养的条件下的贴壁,首先并不是所有的细胞在体外培养的情况下都会贴壁,但大部分来自实体组织器官的细胞都会贴壁。

贴壁的过程可能是这样的:细胞首先分泌细胞外基质,这种细胞外基质黏附在支持物的表面(培养瓶,培养皿的底面)然后,细胞通过其表面表达的黏附因子与这些细胞外基质结合。

细胞粘附分子都是跨膜糖蛋白,分子结构由三部分组成:①胞外区,肽链的N端部分,带有糖链,负责与配体的识别;②跨膜区,多为一次跨膜;③胞质区,肽链的C端部分,一般较小,或与质膜下的骨架成分直接相连,或与胞内的化学信号分子相连,以活化信号转导途径。

细胞体外培养贴壁生长的原因
细胞粘附分子

细胞外基质(ECM),是由动物细胞合成并分泌到胞外、分布在细胞表面或细胞之间的大分子, 主要是一些多糖和蛋白, 或蛋白聚糖。这些物质构成复杂的网架结构,支持并连接组织结构、调节组织的发生和细胞的生理活动。细胞外基质是动物组织的一部分, 不属于任何细胞。它决定结缔组织的特性,对于一些动物组织的细胞具有重要作用。

细胞体外培养贴壁生长的原因
细胞外基质

所以细胞贴壁与否与细胞本身分泌细胞外基质的能力以及细胞本身表达的黏附分子的数量有关,也与培养皿壁的表面结构有关。

3.细胞为什么要贴壁?

细胞贴壁的过程使形态发生很大变化,细胞变形运动是细胞内骨架(是真核细胞中的蛋白纤维网架体系,由微管、微丝及中间纤维组成的体系)本身和细胞外基质共同作用的结果。

细胞为什么要贴壁,可以想象一下,密度大于培养基的细胞(绝大部分细胞)会沉在底面上,那么细胞要生存必定改善这个环境,分泌细胞外基质,然后很自然就贴附在底面上了。

而悬浮细胞,如淋巴细胞由于重力原因沉在培养瓶的底面,但是并不贴附,这可能与细胞表面的黏附分子少以及分泌的细胞外基质过少有关,有人研究用细胞外基质处理培养器皿的底面,即增加细胞外基质,可以使悬浮的淋巴细胞贴壁。

另外,悬浮生长的细胞系THP-l(是一种单核细胞白血病细胞)受到某些药物刺激之后也可以贴壁,这可能与细胞本身分泌的细胞外基质以及细胞表面的黏附分子表达增多有关。密度小于水的细胞,如脂肪细胞,漂浮在液面上,所以不可能贴在底面上,但是如果将培养液加满,那么细胞能够与培养瓶上面的壁接触同样可以贴壁。因此可以说,细胞贴壁是适应环境的一种反应。

 

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